课前记忆1.常用的消毒和灭菌方法有哪些？P10-11页2.选择培养基的概念，P16黑体字

三、微生物的纯培养1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？【思考】灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后杀死接种环上原有微生物。杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞。杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

三、微生物的纯培养2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落。【思考】4.接种结束后,为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养?未接种的培养基表面如果有菌落生长,说明了什么?培养未接种培养基的是对照作用，未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d。判断培养基是否被杂菌污染。若无菌落生长，说明培养基的制备是成功的。若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了,需要重新制备。

1.2微生物的培养技术及应用高压蒸汽灭菌液体培养基二微生物的选择培养与计数

【课程标准】

1.举例说明通过调整培养基的配方和有目的地培养某种微生物。

2.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。

【学习目标】

1.通过对选择培养基概念、微生物选择培养的学习，能够说出稀释涂布平板法的基本过程。

2.通过对微生物数量测定的学习，能够使用选择培养基进行土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。

课题背景自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。稀释涂布平板法呈现的杂菌群那么我们又如何达成这一目标呢？科学家们应用选择性培养基解决了这一难题。

分离固氮菌分离自养型微生物允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。②不加含碳有机物的无碳培养基①不加氮源的无氮培养基3.选择培养基：2.实验室中微生物筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长

探究一选择培养基配方的设计尿素的立体结构尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌之所以能分解尿素，是因为能合成脲酶，来催化尿素分解。讨论：1.你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？见P18页培养基配方设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来

1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_________________________________；该类培养基的主要用途为_____________________；2.从用途上来讲，培养基二属于______培养基，目的是为了获得_____________________；3.两种培养基共有的培养基成分有：________________________；培养基一牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000ml培养基二KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml固体添加了凝固剂琼脂，分离、鉴定、计数选择能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水讨论：

对土样充分稀释后，将菌液涂布到制备好的选择培养基上，即稀释涂布平板法。1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。（一）微生物的选择培养探究二：土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

①梯度稀释方法：稀释涂布平板法铲取土样，将样品装入纸袋中将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。1mL1ⅹ1090mL无菌水1ⅹ1071ⅹ1061ⅹ1031ⅹ1021ⅹ1041mL1mL1mL1mL9mL无菌水1mL1ⅹ105取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌ABB（一）微生物的选择培养

取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷