2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册学习笔记本章知识网络
限制性内切核酸酶
限制性内切核酸酶
DNA连接酶
载体
目的基因的筛选与获取
基因表达载体的构建
食品工业方面
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
蛋白质工程与基因工程的比较
基本操作
基本工具操作程序
农牧业方面
医药卫生领域
应用比较
蛋白质工程的概念、原理及应用
蛋白质工程
基因工程
实验突破一
实验突破一DNA的粗提取与鉴定
一、实验原理
1.提取DNA的原理
利用DNA与和脂质等在物理和化学性质方面的差异，选用适当的物理或化学方法提取DNA,去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：不溶于酒精，但某些溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于
的NaCl溶液。2.鉴定DNA的原理
在一定温度下，DNA遇会呈现o
_
二、实验步骤
取材、
取材、
称取30g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入
研磨
10mL研磨液，充分研磨
过滤
漏斗中垫,将研磨液过滤到烧杯中，4℃处理，取上清液(或离心后，取上清液)
在上清液中加入体积相等的、预冷的溶
分离
液，静置2~3min,用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物(粗提取的DNA),并用滤纸吸去水分(或用离心法取沉淀物)
加入5mL2mol/LNaCl溶液溶解DNA,再加入
鉴定
4mL二苯胺试剂，混合均匀后沸水中加热5min。观察溶液颜色变化
三、操作提示
1.以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止-0
2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧_,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨
1.利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其02.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。3.提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精更佳。
4.实验中进行了2次静置或离心，目的是将和分开，第1次操作后，DNA
存在于中；第2次操作后DNA存在于或_中。【例1】如表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述，不正确的是()
选项
试剂
操作
作用
A
研磨液
与生物材料混合
提取溶解DNA
B
2mol/LNaCl溶液
与提取出的DNA混合
溶解DNA
C
冷却的酒精
加入到离心后的上清液中
溶解DNA
D
二苯胺试剂
加入到溶解有DNA的NaCl溶液中
鉴定DNA
【例2】(2023·河北邯郸高二期中)如图为DNA的粗提取与鉴定实验的部分操作流程。下列相
关叙述正确的是()
研磨液沉淀过滤
研磨液
新鲜洋葱
图1
A.将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
滤液冷酒精图2
图3
B.图2过程中，用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快
C.图2析出得到的白色丝状物只能溶于2mol/L的NaCl溶液中
D.图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂
跟踪训练
1.(2022·山东，13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是()
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
2.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()A.用蒸馏水使家兔的红细胞涨破，可获取富含DNA的滤液
B.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液
C.新鲜的洋葱和猪肝可作为实验材料提取DNA,而菠菜不能用于提取DNA
D.鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴3.下列与“DNA的粗提取与鉴定”实验相关的说法，错误的是()
A.研磨液中应加入DNA酶的抑制剂，以防细胞破碎后DNA酶降解DNA
B.研磨时需要控制好时间，以防影响DNA的提取量
C.鉴定时加入二苯胺试剂后沸水浴即可观察