选修三核心快览大冶一中金扬平

1.传统发酵技术

2.无菌技术消毒活菌煮沸消毒法巴氏消毒灭菌活菌芽孢孢子湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌高压蒸汽灭菌法

3.微生物的纯培养平板划线法稀释涂布平板法菌落数30~300至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值统计的菌落数往往比活菌的实际数目少活菌计数显微镜直接计数活菌数和死菌数的总和细菌计数板血细胞计数板

4.植物组织培养外植体愈伤组织脱分化再分化生长素细胞分裂素酒精消毒30S无菌水清洗2~3次次氯酸钠30分钟无菌水清洗2~3次

5.植物体细胞杂交技术纤维素酶果胶酶物理法（电融合法离心法）化学法（聚乙二醇融合法高Ca2+-高pH融合法）再生出细胞壁克服远缘杂交不亲和的障碍

6.植物细胞工程的应用作物脱毒植物顶端分生区附近（茎尖）病毒极少初生代谢生物生长和生存所必需次生代谢不是生物生长所必需植物细胞培养液体培养基愈伤组织植物组织培养固体培养基得到个体

7.动物细胞培养的条件营养液体培养基血清无菌无毒的环境温度、pH和渗透压气体环境95%空气和5%CO2

8.动物细胞培养胰蛋白酶胶原蛋白酶细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养

9.干细胞胚胎干细胞ES细胞诱导多能干细胞iPS细胞

10.单克隆抗体动物细胞融合PEG融合法电融合法灭活病毒诱导法每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体B淋巴细胞骨髓瘤细胞克隆化培养抗体检测抗体-药物偶联物ADC抗体接头药物

11.体细胞核移植和克隆动物胚胎细胞核移植体细胞核移植MⅡ卵母细胞重构胚

12.胚胎工程精子获能透明带反应卵细胞膜反应桑椹胚囊胚滋养层内细胞团

13.胚胎移植同期发情超数排卵充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力胚胎分割将内细胞团均等分割

14.基因工程的工具限制酶黏性末端平末端DNA连接酶片段与片段不需模板E.coliDNA连接酶仅黏性末端T4DNA连接酶2种末端运载体质粒一个至多个限制酶切割位点能在受体细胞中自我复制标记基因

15.PCRMg2+激活Taq酶引物一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸20~30个核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸变性90℃复性50℃延伸72℃

16.基因表达载体的构建目的基因标记基因启动子终止子启动子：RNA聚合酶识别和结合的部位诱导型启动子：当诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达

17.目的基因的检测和鉴定分子水平的检测PCR等技术检测目的基因或mRNA抗原-抗体杂交技术检测是否翻译出目的蛋白个体生物学水平的鉴定抗虫、抗病接种实验农杆菌转化法T-DNA,将其整合到宿主细胞的染色体上植物显微注射动物受精卵Ca2+处理感受态细胞大肠杆菌

18.基因工程的应用干扰素：一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白乳腺生物反应器：将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控原件重组在一起，通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中

19.蛋白质工程的基本原理改造或合成基因改造现有蛋白质制造一种新的蛋白质预期蛋白质功能设计预期蛋白质的结构推测应有的氨基酸序列找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因获得需要的蛋白质