T/NAIA0003—2020
ICS67.120
X22
团体标准
T/NAIA0003—2020
肌肉中肌苷肌苷酸的测定
高效液相色谱法
（征求意见稿）
2020-XX-XX发布2020-XX-XX实施
宁夏化学分析测试协会发布
T/NAIA0003—2020
肌肉中肌苷肌苷酸的测定
高效液相色谱法
1范围
本标准规定了肌肉中肌苷肌苷酸高效液相色谱法的测定。
本标准适用于肌肉中肌苷肌苷酸的测定。
本方法检测限为：0.01g/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本
适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单位）适用于本标准。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T9695.19肉与肉制品、取样方法
3原理
肌肉组织中肌苷肌苷酸经高氯酸溶液提取后，通过调节pH值至6.5呈弱酸性，试液过
滤膜进高效液相色谱仪经C18色谱柱分离，在254nm波长下紫外检测器（或性能相当的检测
器）检测。
4试剂与材料
除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水
4.1高氯酸。
4.25%高氯酸：取5ml高氯酸加入95ml水中。
4.3磷酸。
4.4三乙胺。
4.5甲醇（色谱纯）。
4.6肌苷标准品（CAS：58-63-9，纯度不低于99.0%）。
4.7肌苷标准储备液（0.8mg/mL）：称取肌苷标准品（4.6）20mg（准确至0,1mg）于25mL
容量瓶中，用水定容。置于4℃冰箱保存，有效期3个月。
4.8肌苷酸标准品（CAS:131-99-7，纯度不低于99.0%）。
4.9肌苷酸标准储备液（1mg/mL）：称取肌苷酸标准品（4.8）50mg（准确至0.1mg）于50mL
容量瓶中，用水定容。置于4℃冰箱保存，有效期3个月。
5仪器和设备
T/NAIA0003—2020
5.1实验室用粉碎机或研钵。
5.2分析天平：感量0.0001g。
5.3均质机。
5.4高效液相色谱仪：配紫外或二极管阵列检测器。
5.5高速离心机。
5.6超声波。
5.7容量瓶：50mL、25mL。
5.8移液管：玻璃移液管0.5mL、1mL、2mL、5mL。
5.9砂芯过滤装置。
6试样制备与保存
取肌肉组织，加液氮研磨或粉碎后置于-80℃冰箱备用。
注：在采样和制备过程中，应避免试样污染，如长途运输应加液氮或冰袋保存。
7测定步骤
7.1试样提取
平行做两份试验。称取2g（准确至0.0001g），置于50mL塑料离心管中，用20mL5%高
氯酸溶液分3次匀浆，匀浆液在4℃下以4000r/min离心10min，上清液转入50mL烧杯中，
沉淀物继续用5%的高氯酸5mL洗涤、离心，反复2次，合并上清液于50mL烧杯，用KOH溶
液调pH至6.5，用蒸馏水定容至50mL，摇匀，经0.45um滤膜过滤装入进样小瓶待测。随同
试样进行空白试验。除不称取样品外，均按试样步骤进行。
7.2色谱条件
色谱柱：C18，长250mm，内径4.6mm，粒径5um，或性能相当；
柱温：25℃；
进样量：20ul；
流动相：取3.5mL磷酸