PCR理论培训试题
一、选择题
1.PCR的中文名称是（）[单选题]*
A.聚合酶链式反应
B.多聚酶链反应
C.聚合酶链锁反应
D.以上都对
答案：D。原因：PCR的英文全称为PolymeraseChainReaction，中文可以译为聚合酶链式反应、多聚酶链反应或者聚合酶链锁反应，这几个译名都指的是同一种生物技术。
2.PCR反应体系中，以下哪种物质提供了反应所需的模板（）[单选题]*
A.dNTP
B.引物
C.模板DNA
D.Taq酶
答案：C。原因：在PCR反应体系中，dNTP是合成DNA的原料，引物是与模板DNA结合引导DNA合成的短链核酸，Taq酶是催化DNA合成的酶，而模板DNA则提供了反应进行的模板序列。
3.Taq酶的最适反应温度是（）[单选题]*
A.37°C
B.55°C
C.72°C
D.95°C
答案：C。原因：Taq酶是一种热稳定的DNA聚合酶，其最适反应温度为72°C，在这个温度下它能够有效地催化以引物为起始点的DNA链延伸反应。
4.PCR反应中，变性步骤的温度一般为（）[单选题]*
A.90-95°C
B.50-55°C
C.60-65°C
D.70-75°C
答案：A。原因：在PCR反应的变性步骤中，需要将双链DNA解开成单链，这个过程一般需要较高的温度，90-95°C能够使DNA的氢键断裂，从而实现双链到单链的转变。
5.以下哪个不是PCR反应的基本步骤（）[单选题]*
A.变性
B.退火
C.延伸
D.连接
答案：D。原因：PCR反应的基本步骤包括变性（使双链DNA变为单链）、退火（引物与模板结合）和延伸（合成新的DNA链），而连接不是PCR反应的基本步骤。
6.PCR反应中，引物的长度一般为（）[多选题]*
A.10-20bp
B.20-30bp
C.30-40bp
D.40-50bp
答案：AB。原因：引物的长度通常在10-30bp之间，10-20bp和20-30bp都在这个合理的长度范围内，30-40bp和40-50bp相对较长，可能会影响引物与模板的特异性结合以及反应效率。
7.下列哪种因素可能影响PCR的特异性（）[单选题]*
A.模板DNA的浓度
B.引物的特异性
C.dNTP的浓度
D.Taq酶的活性
答案：B。原因：引物的特异性决定了它与模板DNA结合的准确性，如果引物特异性差，可能会与非目标序列结合，从而影响PCR的特异性。模板DNA浓度主要影响产物的量，dNTP浓度和Taq酶活性更多地影响反应的效率等方面。
8.在PCR反应中，dNTP的作用是（）[单选题]*
A.提供能量
B.提供碱基
C.激活Taq酶
D.稳定反应体系
答案：B。原因：dNTP（脱氧核糖核苷三磷酸）是合成DNA的原料，它为新合成的DNA链提供了碱基，从而使DNA链得以延伸。
9.PCR反应的退火温度主要取决于（）[单选题]*
A.模板DNA的长度
B.引物的长度和GC含量
C.Taq酶的种类
D.dNTP的浓度
答案：B。原因：引物的长度和GC含量对退火温度影响较大，GC含量高的引物需要较高的退火温度，同时引物较长也需要适当提高退火温度以保证引物与模板的特异性结合，而模板DNA长度、Taq酶种类和dNTP浓度对退火温度影响较小。
10.如果PCR产物出现非特异性条带，可能的原因是（）[多选题]*
A.引物设计不合理
B.退火温度过低
C.模板DNA有污染
D.Taq酶活性过高
答案：ABC。原因：引物设计不合理可能导致引物与非目标序列结合产生非特异性条带；退火温度过低会使引物与模板的结合特异性降低，产生非特异性产物；模板DNA有污染时，污染的DNA可能被扩增从而出现非特异性条带。Taq酶活性过高一般主要影响反应速度和产量，而非特异性条带的产生关系不大。
11.PCR反应中，循环次数过多可能会导致（）[单选题]*
A.特异性产物增加
B.非特异性产物增加
C.反应体系失效
D.产物量不变
答案：B。原因：随着PCR循环次数过多，反应体系中的各种成分逐渐消耗，同时也增加了引物与非目标序列结合的机会，从而导致非特异性产物增加。
12.以下关于PCR反应的说法正确的是（）[单选题]*
A.反应体系中可以没有引物
B.反应不需要镁离子
C.可以同时扩增多个不同的目标序列
D.只能使用一种特定的Taq酶
答案：C。原因：PCR反应可以通过设计多对引物同时扩增多个不同的目标序列。反应体系中引物是必须的，镁离子是Taq酶发挥活性所必需的，并且存在多种不同的Taq酶可供选择。
13.在进行定量PCR时，以下哪种物质可以作为内参基因（）[单选题]*
A.β-actin
B.GFP
C.目的基因本身
D.随机引物
答案：A。原因：β-actin在许多细胞类型中表达相对稳定，可以作为内参基因用于校正定量PCR中的实验误