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文件名称:HLA分型技术课件.ppt
文件大小:625 KB
总页数:17 页
更新时间:2025-05-17
总字数:约小于1千字
文档摘要

HLA分型技术;Variation1%atasinglegeneticlocusinapopulationofindividuals

Eachpolymorphicvariantiscalledanallele

Inthehumanpopulation,over1,695MHCalleleshavebeenidentified;Polymorphicresiduesarelocatedintheantigen-bindinggroove

—Variationinaminoacidsequenceschangestheshapeofthegroove;HLA分型概述;PCR-SSP检测HLA-B27;EveryHLAallelehasitsownuniquesequences;Specificsequenceprimer(SSP)

isdesignedtobindtotheallelicsequencescomplementarily;SequencespecificprimerisusedtotypeHLAallelewithPCR;;实验步骤;三、实验材料和方法

1、血样:0.2mlEDTA抗凝血

2、红细胞裂解液

3、白细胞裂解液

4、PCR混合液

PCRbuffer

HLA-B27SSP

Taq

dNTP

internalpositivereferenceprimers

;HLA-B27检测操作流程;二、PCR扩增

1、吸2ul模板DNA入装有PCR混合液的小管中(注意不要加到石蜡油层);

2、将小管置于PCR仪内进行扩增。(需80min)

;三、电泳检测

吸PCR产物10ul加到2%琼脂糖凝胶孔内;

将琼脂糖凝胶板置电泳槽内电泳160V×20min后取

出,观察结果。

;四、结果观察;SpecificbandscanbeseenwithHLA-B27(+)samples;谢谢聆听!