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食用油中三种抗氧化剂含量的测定气相色谱法
1范围
本文件规定了食用油中三种抗氧化剂含量的测定（叔丁基对苯二酚(TBHQ)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲基苯酚(BHT)）的气相色谱法。
本文件适用食用油中三种抗氧化剂含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
样品中的抗氧化剂用有机溶剂提取,用气相色谱氢火焰离子化检测器检测,采用保留时间定性,外标法定量。
5试剂和材料
本方法所用的试剂，除另有规定外，均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1环己烷：色谱纯。
5.1.2乙酸乙酯：色谱纯。5.1.3乙腈：色谱纯。
5.1.4乙酸乙酯和环己烷混合溶液（1+1）：量取50mL乙酸乙酯和50mL环己烷混匀。
5.2标准品
三种抗氧化剂标准品名称、化学分子式、CAS号和纯度见附表A。
5.3标准溶液配制
5.3.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取三种抗氧化剂标准物质适量，用乙酸乙酯和环己烷混合溶液（（5.1.4）溶解并定容至50.0mL容量瓶中，于4℃冰箱避光保存，保存期限为3个月。
5.3.2混合标准工作溶液：吸取标准储备液0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于一组10mL容量瓶中,用乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容,此标准系列的浓度为10.0μg/mL、
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50.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL、300.0μg/mL、400.0μg/mL、500.0μg/mL,现用现配。
6仪器和设备
6.1气相色谱仪(GC):配氢火焰离子化检测器(FID)。6.2天平：感量0.00001g和0.01g。
6.3涡旋混合器。
6.4高速冷冻离心机：最大转速9000r/min。6.5旋转蒸发仪
7分析步骤
7.1试样制备
液体样品混合均匀,取有代表性试样,密封保存。
7.2试液的提取与净化
7.2.1试液的提取
称取1.0g（精确至0.1g）样品于50mL具塞离心管中，加入3mL乙腈饱和的正己烷溶解样品，涡旋混合1min，加入4mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，静置10min分层，收集乙腈层于另一试管中，再重复使用3mL正己烷饱和的乙腈溶液提取2次，合并3次提取液氮吹至近干，用2.0mL乙酸乙酯∶环己烷(1∶1，V/V)定容，供气相色谱测定。BHA、BHT、TBHQ混合基质工作曲线的空白基质加标样品按上述相同步骤处理，供气相色谱测定。
7.3仪器参考条件
7.3.1色谱参考条件
a）色谱柱：5%苯基-甲基聚硅氧烷毛细管柱，0.25mm×30m，或性能相当。
b）进样口温度：220℃。
c）进样量：1μL，不分流进样。
d）载气流速：1mL/min。e）检测器温度：250℃。
f）程序升温：初始柱温80℃,保持1min，以10℃/min升温至250℃,保持5min。
7.4标准曲线的制作
将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应的抗氧化剂，以标准工作液的浓度为横坐标，以响应值（峰面积）为纵坐标，绘制标准曲线，BHA、BHT、TBHQ三种抗氧化剂的标准溶液气相色谱图见附录。
7.4试样溶液的测定
将试样溶液注入气相色谱仪中，测得峰面积，以保留时间定性。根据标准曲线得到待测液中各目标化合物的浓度。
8分析结果的表述
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试样中BHA、BHT、TBHQ含量按式（1）进行计算：
c×
c×V
（1
（1）
式中：
X──试样中各种化合物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
c──由标准曲线计算出的试样溶液浓度，单位为微克每毫升(μg/mL）；V──试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；
m──试样质量，单位为克（g）。计算结果保留三位有效数字。
9精密度
在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
10其他
当称样量为5.0g时，叔丁基对苯二酚(TBHQ)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲基苯酚(BHT)定量