食用油中三种抗氧化剂含量的测定气相色谱法
1范围
本文件规定了食用油中三种抗氧化剂含量的测定（叔丁基对苯二酚(TBHQ)、叔丁基对羟基茴
香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲基苯酚(BHT)）的气相色谱法。
本文件适用食用油中三种抗氧化剂含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
样品中的抗氧化剂用有机溶剂提取,用气相色谱氢火焰离子化检测器检测,采用保留时间定性,
外标法定量。
5试剂和材料
本方法所用的试剂，除另有规定外，均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1环己烷：色谱纯。
5.1.2乙酸乙酯：色谱纯。
5.1.3乙腈：色谱纯。
5.1.4乙酸乙酯和环己烷混合溶液（1+1）：量取50mL乙酸乙酯和50mL环己烷混匀。
5.2标准品
三种抗氧化剂标准品名称、化学分子式、CAS号和纯度见附表A。
5.3标准溶液配制
5.3.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取三种抗氧化剂标准物质适量，用乙酸乙酯和环
己烷混合溶液（（5.1.4）溶解并定容至50.0mL容量瓶中，于4℃冰箱避光保存，保存期限为3个月。
5.3.2混合标准工作溶液：吸取标准储备液0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、
5.0mL于一组10mL容量瓶中,用乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容,此标准系列的浓度为10.0μg/mL、
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50.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL、300.0μg/mL、400.0μg/mL、500.0μg/mL,现用现配。
6仪器和设备
6.1气相色谱仪(GC):配氢火焰离子化检测器(FID)。
6.2天平：感量0.00001g和0.01g。
6.3涡旋混合器。
6.4高速冷冻离心机：最大转速9000r/min。
6.5旋转蒸发仪
7分析步骤
7.1试样制备
液体样品混合均匀,取有代表性试样,密封保存。
7.2试液的提取与净化
7.2.1试液的提取
称取1.0g（精确至0.1g）样品于50mL具塞离心管中，加入3mL乙腈饱和的正己烷溶解样品，
涡旋混合1min，加入4mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，静置10min分层，收集乙腈层于
另一试管中，再重复使用3mL正己烷饱和的乙腈溶液提取2次，合并3次提取液氮吹至近干，用
2.0mL乙酸乙酯∶环己烷(1∶1，V/V)定容，供气相色谱测定。BHA、BHT、TBHQ混合基质工作曲
线的空白基质加标样品按上述相同步骤处理，供气相色谱测定。
7.3仪器参考条件
7.3.1色谱参考条件
a）色谱柱：5%苯基-甲基聚硅氧烷毛细管柱，0.25mm×30m，或性能相当。
b）进样口温度：220℃。
c）进样量：1μL，不分流进样。
d）载气流速：1mL/min。
e）检测器温度：250℃。
f）程序升温：初始柱温80℃，保持1min，以10℃/min升温至250℃，保持5min。
7.4标准曲线的制作
将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应的抗氧化剂，以标准工作液的浓度为横坐
标，以响应值（峰面积）为纵坐标，绘制标准曲线，BHA、BHT、TBHQ三种抗氧化剂的标准溶液
气相色谱图见附录。
7.4试样溶液的测定
将试样溶液注入气相色谱仪中，测得峰面积，以保留时间定性。根据标准曲线得到待测液中各
目标化合物的浓度。
8分析结果的表述
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试样中BHA、BHT、TBHQ含量按式（1）进行计算：