归纳:基因工程的基本操作程序获取目的基因从基因文库利用PCR技术扩增目的基因人工合成（反转录法，化学人工合成）构建基因表达载体目的基因、启动子、终止子、标记基因等将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理法目的基因的检测与鉴定检测(分子水平检测)：是否插入、转录、翻译鉴定（个体水平鉴定）：抗虫、抗病的接种实验第31页，共51页，星期日，2025年，2月5日课堂练习1、有关基因工程的叙述中，错误的是()A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A第32页，共51页，星期日，2025年，2月5日课堂练习2、下列属于获取目的基因的方法的是()①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取④利用PCR技术⑤利用DNA转录 ⑥人工合成A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥D第33页，共51页，星期日，2025年，2月5日课堂练习3、有关基因工程的叙述正确的是（）A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料D第34页，共51页，星期日，2025年，2月5日课堂练习4、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达C【拓展深化】只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对第35页，共51页，星期日，2025年，2月5日课堂练习4．(2009年高考浙江卷)下列关于基因工程的叙述，错误的是()A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B．限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达D第36页，共51页，星期日，2025年，2月5日提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶酶切一定大小的DNA片段将DNA片段与载体连接重组载体基因组文库导入受体菌中储存（2）.基因文库的构建方法①基因组文库的构建第37页，共51页，星期日，2025年，2月5日关于基因工程的基本操作程序(2)第1页，共51页，星期日，2025年，2月5日基因工程基本操作的四个步骤1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。1.2基因工程的基本操作程序第2页，共51页，星期日，2025年，2月5日第3页，共51页，星期日，2025年，2月5日一、目的基因的获取1目的基因主要是编码蛋白质的基因：如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的基因、具调控作用的因子等。2获取目的基因的常用方法：1、从已有物种中分离：如从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增目的基因3、人工合成目的基因第4页，共51页，星期日，2025年，2月5日1.从基因文库中获取目的基因1).基因文库的概念:将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。基因文库的种类:基因组文库：含有一种生物的全部基因部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因，如：cDNA文库第5页，共51页，星期日，2025年，2月5日基因组文库1.从基因文库中获取目的基因各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。受体菌群包含了这种生物所有的基因，该受体菌群称为这种生物的基因组文库。受体菌