2.受体细胞的选择
(1)对于植物来说，受体细胞可以是受精卵或体细胞，因为植物细胞具有全能性。
(2)对于动物来说，受体细胞一般是受精卵，因为：
(3)在生产需要加工和分泌的蛋白质时，受体细胞选大肠杆菌还是酵母菌更适宜？
核心归纳
受精卵的全能性高，而高度分化的动物体细胞的全能性受到抑制。
选酵母菌。大肠杆菌为原核细胞无内质网和高尔基体，无法加工和运输蛋白质；而酵母菌作为真核细胞具有内质网、高尔基体，能对蛋白质进行加工和运输。
①受体细胞：
原核细胞（常用大肠杆菌）
优点：
繁殖周期短
体积小易于培养操作
多为单细胞
遗传物质相对较少
（3）将目的基因导入微生物细胞——Ca2+处理法
使用Ca2+处理的目的：
增加细胞膜的通透性，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态细胞）。
吸收
感受态细胞
03
（2）将目的基因导入动物细胞——显微注射法
PCR技术
PCR技术
DNA-mRNA分子杂交
1.PCR在生物学实验中具有非常广泛的用途，下列不属于PCR的应用范畴的是()
A.扩增和筛选目的基因
B.检测目的基因是否导入受体细胞
C.检测目的基因是否转录出mRNA
D.检测目的基因是否翻译出蛋白质
D
③检测目的基因是否翻译（表达出目的蛋白）
从转基因生物提取出蛋白质和相应的抗体进行杂交，如果出现抗原-抗体杂交带，说明目的基因已经翻译。
04
目的基因的检测与鉴定
——通过抗原-抗体杂交
转基因生物
鉴定方法
成功标志
抗虫植物
抗病毒（菌）植物
抗盐植物
抗除草剂植物
获取目的基因产物的转基因生物
饲喂害虫（害虫接种实验）
害虫死亡
病毒（菌）接种实验
未染病
盐水浇灌
正常生长
喷洒除草剂
正常生长
提取细胞产物与天然产品进行功能、活性比较
功能、活性正常
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等----个体生物学水平的鉴定
04
目的基因的检测与鉴定
(1)花粉管通道法是我国科学家独创的一种方法，主要适用于双子叶植物和裸子植物。()
(2)培育转基因动物时，常选择受精卵作为受体细胞，利用显微注射法将目的基因直接注入受精卵中。()
(3)可以通过盐碱地栽培试验从细胞水平上检测转基因抗盐碱作物是否具有抗盐碱的特性以及抗盐碱的程度。()
×
×
×
【基础过关】
（农杆菌转化法）
个体生物学水平
需构建基因表达载体
一、真核细胞的基因结构
编码区
非编码区
非编码区
内含子
外显子
启动子
终止子
编码区上游
编码区下游
编码区：
间隔的、不连续的
有外显子、内含子之分
间隔的、不连续的
外显子：
内含子：
能转录相应的mRNA，进一步能编码蛋白质的DNA序列
能转录相应的mRNA，但却不能编码蛋白质的DNA序列
【补充】基因的结构
真核细胞中：不能编码蛋白质的序列=内含子+非编码区序列
编码序列=外显子
转录
前体mRNA
成熟mRNA
剪切、拼接
不完全相同
原因：基因的选择性表达。
【思考】同一个体不同体细胞中DNA转录的起点是否相同
（选“相同/不相同/不完全相同”）？为什么？
【补充】基因的结构
二、原核细胞的基因结构
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
启动子
终止子
连续的、不间隔的
如果把一个真核生物的基因导入原核细胞中表达，一定会产生原来的蛋白质吗？
提示：一般不能产生原来的蛋白质
原因：
①原核生物细胞里没有相应的酶来去除内含子；
②原核生物没有蛋白质加工系统（如内质网、高尔基体等）
03
将目的基因导入受体细胞
DNA的粗提取与鉴定
一、实验原理：
1．提取DNA的原理
2．鉴定DNA的原理
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。
在一定温度下（沸水浴），DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
不是只能溶于2mol/L的NaCl溶液中
DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等
不能选择哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA
二、材料用具
1.选材：
注意：
2.试剂：
①研磨液
②体积分数为95%的酒精
③2mol/L的NaCl溶液
④二苯胺试剂
⑤蒸馏水
析出DNA，初步分离DNA与蛋白质
溶解DNA，过滤后，DNA在滤液中
鉴定DNA，要现配现用，否则二苯胺变成浅蓝色，影响鉴定效果
含有NaCl、洗涤剂
（猪肝与猪血不同）
1.取材、研磨：
称取30g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒