脐血造血干细胞提取制备
脐血采集
在胎儿娩出、脐带结扎后，立即进行脐血采集。这一阶段需严格遵守无菌操作，使用专用的脐血采集袋。采集量一般为60-120毫升，足够的血量能保证获取足够数量的造血干细胞。研究表明，采集量达80毫升以上时，成功用于造血干细胞移植的概率更高。采集过程通常在10-15分钟内完成，以减少血液凝固风险。
运输与接收
采集后的脐血需在规定时间内，以特定温度（一般为4℃左右）运输至制备实验室。运输过程中的温度稳定性至关重要，温度波动可能影响造血干细胞活性。接收脐血时，工作人员需核对信息，检查血袋完整性及血液外观，确保脐血质量符合制备要求。
分离与提取
采用密度梯度离心等方法分离脐血中的单个核细胞，该细胞群富含造血干细胞。利用细胞表面标志物，通过免疫磁珠法等技术进一步富集造血干细胞。例如，使用抗CD34抗体标记磁珠，与脐血中的CD34?造血干细胞结合，在磁场作用下实现分离。经此步骤，可将造血干细胞纯度提高至80%-90%。
细胞计数与活性检测
运用细胞计数仪精确计算提取的造血干细胞数量，确保细胞数量达到治疗标准。同时，通过台盼蓝染色等方法检测细胞活性，正常情况下，造血干细胞活性应在90%以上。活性高的细胞在移植后更易存活并发挥造血重建功能。
制备与冻存
将分离提取并检测合格的造血干细胞，加入含有保护剂（如二甲基亚砜）的冻存液中，调整细胞浓度至合适范围，分装至冻存袋。采用程序降温法，以特定速率缓慢降温至-80℃，随后转移至液氮罐（-196℃）长期保存。低温环境可使细胞代谢活动几乎停滞，维持细胞活性。研究显示，在液氮环境下，脐血造血干细胞可保存数年至数十年，仍能保持良好活性用于移植。
质量控制
整个制备过程需进行严格质量控制，对每批脐血进行细菌、真菌、病毒等微生物检测，确保无病原体污染。同时，监测制备过程中的各项参数，保证操作的规范性和稳定性，以提供高质量的脐血造血干细胞产品。