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X(XXXXX)
T/GZ(XX)
团体标准
T/GZ(XX)000-2022
刺梨果实及原汁中总黄酮的检测方法
2022-XX-XX发布2022-XX-XX实施
贵州省刺梨行业协会发布
T/GZ(XX)000-2022
刺梨果实及原汁中总黄酮的测定
A
1范围
本标准规定了刺梨果实及原汁中黄酮类化合物总量的检测方法。
本标准仅适用于刺梨果实及原汁中黄酮类化合物的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
3方法提要
黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的一类天然化合物的总称,本方法利用其与铝盐进行络合
反应,在碱性条件下生成黄色的络合物,在420nm波长下测定其吸光度,在一定浓度范围内,其吸
光度与黄酮类化合物的含量成正比。与芦丁标准品比较,进行待测物中总黄酮的定量测定。
4试剂和材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂,试验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。
4.1硝酸铝[Al(NO)·9HO]。
332
4.2硝酸铝溶液(100g/L):称取Al(NO)·9HO17.6g,加水溶解,定溶于100mL容量瓶中。
332
4.3醋酸钾(CHCOOK)。3
4.4醋酸钾溶液(98g/L):称取醋酸钾9.814g,加水溶解,定溶于100mL容量瓶中。
4.5芦丁标准品,CAS号153-18-4。
4.6芦丁标准溶液:精密称取经干燥(120℃减压干燥)至恒重的芦丁标准品50mg,使用无水乙
醇溶解并定容与50mL容量瓶中。
4.7无水乙醇(CHOH)。
25
4.830%乙醇(无水乙醇与蒸馏水按3:7比例配制)。
5仪器设备
5.1可见分光光度计,采用1cm比色皿。
5.2分析天平:感量为0.01g和0.0001g。
T/GZ(XX)000-2022
5.3超声清洗仪。
5.4组织捣碎机。
5.5离心机。
6样品制备与保存
6.1试样制备
6.1.1刺梨果实样品
将刺梨果实样品使用高速组织捣碎机进行破碎,过40目筛,混匀后存放于-20℃条件下避光保
存。
6.1.2刺梨原汁样品
将刺梨原汁样品存放于4℃冷藏箱中避光保存。
6.2试样保存
制样操作过程应防止样品受到污染。
7测定步骤
7.1提取
精密称取刺梨果实样品1g(精确到1mg)置于100mL烘干恒重三角瓶中。
精密吸取刺梨原汁样品5mL~10mL样品置于100mL烘干恒重三角瓶中,称重(精确到1mg)供
后续测定使用。
加入约30mL无水乙醇(4.7)充分摇匀样品,将摇匀样品置于超声清洗器中超声浸提1h,其间
每20min摇匀溶液一次。对于脂肪、色素等杂质较多的样品可加入适量石油醚提取,移除石油醚。
提取液过滤至50mL容量瓶中,使用无水乙醇(4.7)冲洗滤纸、三角瓶,合并溶液,带溶液冷却至
室温,用无水乙醇(4.7)定容至50mL待测。
7.2绘制标准曲线