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ATP、MDA、GSSG、辅酶ⅡNADP(H)、还原型谷胱甘肽(GSH)这些试剂盒都可以用血浆进行检测吗？这些指标全部检测大概需要多少量的血浆？

一、试剂盒是否可用血浆检测

通常情况下，大多数生化指标检测可使用血浆或血清，但具体需以试剂盒说明书为准。以下是各指标的一般情况：

指标

是否可用血浆检测

备注

ATP（腺苷三磷酸）

部分试剂盒支持

需注意血浆中抗凝剂（如肝素）可能影响酶活性，建议使用预冷离心管快速分离血浆并立即检测。

MDA（丙二醛）

支持

常用于氧化应激检测，血浆需避免溶血（红细胞破裂会释放血红蛋白干扰结果）。

GSSG（氧化型谷胱甘肽）

支持

需注意血浆中谷胱甘肽还原酶可能影响GSSG稳定性，建议样本低温保存并尽快检测。

辅酶ⅡNADP(H)

部分试剂盒支持

NADP(H)参与氧化还原反应，血浆检测需关注抗凝剂（如EDTA）是否螯合金属离子（影响酶活性）。

还原型谷胱甘肽(GSH)

支持

GSH易被氧化，需使用预冷的抗凝管（如含DTT的试管），并在冰上操作以保持稳定性。

注意事项：

以说明书要求的样本类型为准。

若血浆中含有抗凝剂（如肝素、EDTA、柠檬酸盐），需确认其是否与莱贸生物试剂盒试剂兼容（可能干扰酶反应或显色）。

若样本需长期保存，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻融影响指标稳定性。

二、全部指标检测所需血浆量

检测所需血浆量取决于试剂盒的检测方法（如微量法、可见分光光度法）和样本重复次数（如平行孔数）。以下为估算范围：

指标

单样本检测量（μL）

备注

ATP

50~200

需根据细胞/组织裂解液或血浆直接检测模式调整。

MDA

50~100

通常采用硫代巴比妥酸（TBA）法，样本用量较少。

GSSG

100~200

需先通过化学方法去除GSH（如N-乙基马来酰亚胺），步骤复杂可能增加样本消耗。

NADP(H)

50~150

依赖酶循环法或分光光度法，需先做预实验优化样本稀释比例。

GSH

50~100

常用DTNB显色法，样本用量少且灵敏度高。

总血浆量估算：若每个指标检测?1个样本（单孔），且按最大用量计算，总需求量约为：\(200(\text{ATP})+100(\text{MDA})+200(\text{GSSG})+150(\text{NADP(H)})+100(\text{GSH})=750~\mu\text{L}\)若需?平行检测2~3孔?或包含标准曲线，建议预留?1~2mL血浆。

三、样本采集与处理建议

采血与抗凝：

使用含抗凝剂（如肝素锂、EDTA-K2）的采血管，避免溶血（红细胞破裂会释放ATP、GSH等干扰检测）。

采血后需在?30分钟内离心（4℃，3000rpm，10分钟），分离血浆并转移至预冷EP管。

保存条件：

若无法立即检测，血浆需分装后?-80℃冻存（避免反复冻融），保存期通常不超过3个月。

四、总结

可行性：大部分指标（MDA、GSSG、GSH）可用血浆检测，ATP和NADP(H)需确认试剂盒要求及抗凝剂影响。

血浆量：单样本全指标检测约需?0.5~2mL血浆（根据平行孔数和试剂盒灵敏度调整）。

关键操作：低温离心、避免溶血、抗凝剂兼容、样本及时冻存，以确保检测结果准确性。

建议在实验前仔细阅读莱贸生物试剂盒说明书，并通过预实验优化样本处理流程。

本文由莱贸生物科技（上海）有限公司提供。