关于实验四过碘酸雪夫反应第1页，共30页，星期日，2025年，2月5日细胞化学染色的步骤：1.固定：将细胞的生前结构和化学物质保存下来。2.显示：通过一系列化学反应形成稳定的有色沉淀。3.复染：使各种细胞都显示出来以便于观察。细胞化学染色的实用价值一、协助白血病的诊断1.急性白血病细胞类型的鉴别。检查顺序：POXPASNAE+NaFNCE2.协助慢性白血病的诊断。NAPPAS二、协助贫血的诊断1.缺铁性贫血：铁染色2.再障：NAP3.铁粒幼细胞性贫血：铁染色三、鉴别某些容易混淆的细胞以协助诊断四、协助鉴别良性与恶性的淋巴细胞疾病五、协助两种感染的鉴别第2页，共30页，星期日，2025年，2月5日实验四过碘酸-雪夫反应(糖原染色)
[目的要求]1．掌握本实验的原理和临床意义。2．熟悉本实验的操作方法及注意事项。[实验原理]糖原中的1，2-乙二醇基经高碘酸氧化后产生醛基，此醛基进而与雪夫(Schiff)液作用，使无色品红变为红色的化合物，定位于胞浆中。[实验器材和试剂]1．10g／L高碘酸液2．雪夫(Schiff)染液3．亚硫酸液4．20g／L甲绿5．染色架、洗耳球、接水盘及吸水纸。6．光学显微镜、香柏油、乙醚和擦镜纸。第3页，共30页，星期日，2025年，2月5日第4页，共30页，星期日，2025年，2月5日第5页，共30页，星期日，2025年，2月5日第6页，共30页，星期日，2025年，2月5日[实验步骤]
1．新鲜血片或骨髓片用95％乙醇固定10min，蒸馏水冲洗，待干。2．10g／L高碘酸氧化15～20min，蒸馏水冲洗，待干。3．置雪夫试液室温染色30～60min。4．用亚硫酸溶液冲洗3次后，以自来水冲洗2～3min，待干。5．20g／L甲绿复染10～20min。6．水洗，待干，镜检。7．结果(1)阳性反应：在细胞浆内染红色，呈弥漫状、颗粒或块状。胞核染成绿色。阴性反应，胞浆无色。(2)反应强度判断标准：①中性粒细胞的分级标准：(－)胞浆无红色颗粒。(+)胞浆内呈淡红色有极少颗粒。(++)胞浆呈红色，厚而不透明，或有较少颗粒。(+++)胞浆呈深红色，颗粒紧密，但尚有空隙。(++++)胞浆呈深紫红色，颗粒紧密，无空隙。?第7页，共30页，星期日，2025年，2月5日②淋巴细胞分级标准：(－)胞浆内无颗粒。(+)胞浆内呈弥散淡红或有少数细颗粒(9个)。(++)胞浆内呈弥散较深的红色或有多数细颗粒(10个)。(+++)胞浆内有较粗颗粒或少数小块状。(++++)胞浆内呈多数粗颗粒并有大块红色物质。?③幼红细胞的分级标准：(－)胞浆内无颗粒。(+)胞浆内有少数分散细小颗粒或浅红色弥漫物质。(++)胞浆内有1～10个中等颗粒或弥漫的红色。(+++)胞浆内有11～20个较粗颗粒或呈深红色。(++++)胞浆颗粒较多，20个以上，并且粗，致密且呈紫红色。第8页，共30页，星期日，2025年，2月5日④巨核细胞的分级标准：(－)细胞内没有糖原，但细胞浆内有弥散性着色，此系其它多糖类物质。(+)含少量糖原，即含数小块或一大块糖原，糖原常定位于近核膜处。(++)胞浆内含有中等糖原，即含许多小块或少数大块糖原，约占胞质的1/3。(+++)胞浆内含有大量糖原，呈大块状，其总面积约占胞浆面积的1/2以上。（＋＋＋＋）胞浆内充满糖原。(3)阳性率和阳性积分：根据不同情况的需要，观察同一类细胞100个，求出阳性率的百分比，将百分率与分级数的积相加，其总和即为积分。第9页，共30页，星期日，2025年，2月5日第10页，共30页，星期日，2025年，2月5日第11页，共30页，星期日，2025年，2月5日第12页，共30页，星期日，2025年，2月5日第13页，共30页，星期日，2025年，2月5日第14页，共30页，星期日，2025年，2月5日第15页，共30页，星期日，2025年，2月5日实验五过氧化物酶(POX)染色[目的要求]1．?掌握本实验的原理和临床意义。2．?熟悉本实验的操作方法及注意事项。[实验原理]细胞内的过氧化物酶能将底物的过氧