河南欧诺生物科技有限公HenanOunuoBiotechnologyCo.LTD
食用油中苯并（a）芘（BaP）ELISA检测试剂盒使用说明书
（货号：Ounuo95001）检测限：1.5μg/kg定量区间：2-20μg/kg
本产品可以采用单点定标，即点1个标准品实现定量分析，最大可实现47个样本的检测。采用单点定标
时，数据分析请来电索取专门的Excel数据分析软件
1.样本前处理（动植物性食用油脂，如菜籽油、大豆油、花生油、玉米油、调和油等）
需要但未提供的试剂和器皿如下：
(1)二氯甲烷，分析纯【提示】
(2)正己烷，分析纯BaPSPE柱（货号：FS-06001）随试剂盒一起配发
(3)甲醇，分析纯前处理所需试剂A、试剂B、试剂C配套在BaPSPE
(4)去离子水柱中
(5)5mL圆底或锥底玻璃离心管
(6)2ml玻璃进样瓶或者5ml圆底玻璃试管（一次性）
(7)5mL有机玻璃离心管架（24孔），1个
(8)17*17*10cm瓷盘，1个
试剂配制
预处理试剂：取1管试剂A，加入到1瓶试剂B中，剧烈震荡使其完全溶解，备用【配制好的预处理试剂
呈白色半透明状，于2-8℃保存有效期10天】
1.1预处理
1）称取0.4±0.005g油样于5mL玻璃离心管中，加入0.4mL预处理试剂混匀；
2）室温静置5min（离心管斜躺在桌面上）
3）加入0.4mL去离子水、1mL正己烷剧烈振荡2min；静置分层约1min（此时可以先活化柱子）
1.2过SPE柱【注意】
1）活化：依次采用1mL二氯甲烷、1mL正己烷过柱不小心取到下层水相，可以将
2）上样：取1mL上层待净化液加入柱中（见1.1预处理-3））；移液器垂直后排出水相即可
3）淋洗：依次用1mL正己烷、1mL试剂C淋洗，最后吹空气3s；
4）解吸：加入1mL二氯甲烷解吸（流速1mL/min），收集全部解吸液于2mL玻璃进样瓶中
5）浓缩及复溶：40℃水浴氮吹干；加入1mL甲醇涡旋15s；取0.1mL甲醇复溶液，再加入
0.1mL样本稀释液涡旋15s
2.操作步骤
实验前，请将检测试剂盒从2-8℃冰箱中取出，于室内温度20-28℃下平衡1小时！
1）取出平衡后的适量板条，其余放回铝膜袋中；
2）依次：加50μL标准品/样本于相应微孔中；加50μL酶结合物和50μL抗体至所有微孔；
3）盖上板贴，于20-28℃下，孵育20分钟；倒出微孔中液体；
4）将洗涤液注满微孔浸泡15s倒出，重复2次；
5）加100μL底物至微孔中，于20-28℃下，孵育10分钟；
6）加100μL终止液至微孔中，于450/630nm波长下，读数
3.结果分析
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1）结合率计算公式
A
B?100%i
A
0
其中，
B：为i样本或浓度点的结合率；
A：为i样本或浓度点的吸光度；i
A：为零标准孔的吸光度；