河南欧诺生物科技有限公司HenanOunuoBiotechnologyCo.LTD
食用油中邻苯二甲酸二丁酯（DBP）ELISA检测试剂盒
使用说明书
货号：OUNUO95002
检测限：0.06mg/kg定量区间：0.1-1mg/kg
本产品可以采用单点定标，即点1个标准品实现定量分析，最大可实现47个样本的检测。采用单点定标
时，数据分析请来电索取专门的Excel数据分析软件
1.样本前处理（动植物性食用油脂，如菜籽油、大豆油、花生油、玉米油、调和油等）
需要但未提供的试剂和器皿如下：【注意事项】
(1)二甲基亚砜，分析纯1.塑化剂前处理过程不得使用塑料制品
(2)去离子水2.二甲基亚砜验证是否含有塑化剂：进行上机确证或者取0.1mL二
(3)5mL玻璃离心管、2mL玻璃进样瓶甲基亚砜，加入0.9mL样本稀释液混匀后采用ELISA检测
3.塑料制品经过迁移实验验证，确定不会有塑化剂迁移出，则可以
使用
动植物性食用油
1）称取1.5±0.01g油样于5mL玻璃离心管中，加入1.5mL二甲基亚砜振荡3min；
2）4000rpm，离心1min；
3）弃去上层液体，取下层1mL加入净化管中，加入0.2mLDBP净化试剂A振荡1min；
4）4000rpm，离心1min；
5）取0.1mL上清加入0.9mL样本稀释液中涡旋15s；
样本稀释倍数：10
2.操作步骤
实验前，请将检测试剂盒从2-8℃冰箱中取出，于室内温度20-28℃下平衡1小时以上！
试剂配制
洗涤液（1×）：取1体积的20×浓缩洗液，加入19体积的去离子水或蒸馏水混匀，备用，可按需配制
1）取出平衡后的适量板条，其余放回铝膜袋中；
2）加150μLDBP活化试剂于微孔中；轻敲板架；
3）盖上板贴，于20-28℃下，静置5分钟后倒出，于拍板布上尽可能干的拍出孔内液体；
4）依次加50μL标准品/样本于相应微孔中；加50μL酶结合物和50μL抗体至所有微孔；轻敲板架；
5）盖上板贴，于20-28℃下，孵育20分钟；倒出微孔中液体；
6）将洗涤液注满微孔浸泡15s倒出，重复4次，共计5次；并于拍板布上尽可能干的拍出孔内液体；
7）加100μL底物至微孔中，轻敲板架，盖上板贴，于20-28℃下，孵育10分钟；
8）揭开板贴，不要倒出液体，直接加100μL终止液至微孔中，轻敲板架，于450/630nm波长下，读数；
3.结果分析
1）结果计算
将检测的吸光度值输入到配套计算软件的相应位置即可计算出样本中中塑化剂（DBP）的含量。
2）超出检测上限的样本稀释方法
①将样本前处理步骤“4）”中样本上清液先用样本提取液稀释，可以10倍梯度稀释至曲线范围内，
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再按照说明书步骤“5）”操作；
②将得出的含量再乘以相应地稀释倍数，即为最终样本中塑化剂DBP的含量；
4.注意事项、常见问题分析及解决办法
1）注意事项
?不同产品、不同批次之间试剂不得混用；
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