考马斯亮蓝染色比色法
实验器材：
T6型紫外分光光度计
检测仓控制面板单色光入射口比色皿
实验流程
取出洁净的试管，标记，按要求加入蒸馏水和标准蛋白质试样溶液。
向管内加入考马斯亮蓝色染色液。
立即使用移液器上下吹打混匀，也可以盖上盖子上下颠倒混匀。完毕后室温放置5min。
打开分光光度计电源，将试样溶液移至干净洁净的比色皿中（溶液大概高度为2/3处），擦净比色皿光面放入检测仓内。参比管（未加入蛋白质）放在最靠近检测人的位置。将其他试样管放入检测仓内。
关闭检测仓门，设置实验参数。（光度测量→检测波长→输入595nm→Enter确认→Zero调零→开始检测Start）。
记录数据，取出比色皿并清洗。
结果处理与注意事项
计算方法：
采用标准曲线法，通过标准曲线的拟合，计算出待测样本的蛋白质浓度。主要实验数据是标准溶液和待测样本的吸光度。
首先，试样溶液的紫外吸收光度值要进行空白扣减，需注意，使用T6型紫外分光光度计，测定值即为扣减后的数值。
实验处理：
绘制蛋白质含量的标准曲线，以标准蛋白质试样溶液浓度为横坐标，各种试样溶液的紫外吸收值为纵坐标，绘制散点图。
选择线性拟合方式，拟合得出线性方程，同时自动计算出线性回归系数R2值。R2值越接近1，代表拟合程度越好。
将待测溶液的吸光光度值代入线性拟合方程中，计算得到X值，即为待测蛋白质试样溶液的浓度。
典型错误操作
比色皿选择错误：本实验不能使用石英比色皿进行含量测定。可采用一次性的塑料比色皿或玻璃比色皿进行检测。
比色皿光面毛面放反。
比色皿没有擦干或者使用纸巾擦拭。
加入比色皿的液体过少：液面高度在比色皿的2/3处为宜，加入过少导致检测溶液不能完全覆盖入射光照射面。
溶液未混匀。
溶液放置时间：放置时间过长导致产物生成过多，超出仪器检测范围。放置时间过短，导致反应产物过少，反应不完全。
观看心得
最开始的凯氏定氮法由于检测手段的缺陷，导致不少的商家利用缺陷进行蛋白质含氮量的掺假。这些造假手段不仅仅是对科学精神的亵渎，更是对同行和公众的欺骗，严重危害了人们的健康安全。凯氏定氮法因其检测原理和技术限制，在面对精心设计的掺假行为时显得力不从心。该方法是通过对样品中氮含量的测定，进而推算出蛋白质的大致含量，这本是一项科学严谨的技术。然而，正是由于这种方法只能间接反映蛋白质的存在，并且对于不同来源的氮化合物缺乏区分度，给了不法分子可乘之机。他们通过添加廉价且高氮的非蛋白物质，如三聚氰胺，来人为提高检测结果中的氮含量，从而误导消费者和监管者，让劣质甚至是有害的产品披上了“高品质”的外衣。
这种行为不仅仅是对科学精神的践踏，更是对人类道德底线的挑衅。它直接损害了消费者的健康权益，引发了严重的食品安全危机。以震惊全国的三鹿奶粉事件为例，无数无辜的儿童因此而遭受肾结石等健康问题，家庭承受无尽的痛苦和社会信任遭到前所未有的冲击。这起事件深刻揭示了一个事实：当商业利益凌驾于伦理责任之上时，其后果将是灾难性的。
面对这样的现实，社会各界纷纷觉醒，政府加大了法律法规的制定和完善力度，提高了食品检测标准和技术门槛，力求从源头堵住漏洞，严惩违法行为。科研人员也在不懈努力，开发更为精准高效的检测技术。与此同时，企业界也逐渐认识到，诚信经营才是长久之道。越来越多的企业开始注重产品品质和品牌信誉，建立健全内部质量控制体系，积极参与行业自律组织，致力于打造一个透明、公平、健康的市场环境。消费者权益保护意识的提升，也让市场需求倒逼企业必须正视产品质量问题，任何试图蒙混过关的行为都将受到市场的严厉惩罚。
综上所述，虽然凯氏定氮法的局限曾被不良商家利用，造成了一系列令人痛心疾首的食品安全事故，但它同时也催生了一场自上而下的变革。这场变革促使科学技术不断进步，法律制度日益完善，企业社会责任感显著增强，最终目标都是为了守护每一个普通人的餐桌安全，维护整个社会的健康稳定发展。在这个过程中，每一次挫折都转化为前进的动力，每一份伤痛都转化成警示的力量，共同编织出一张密实的安全网，让未来的食品世界变得更加纯净、安心。
本实验以检测蛋白质含量为目的，介绍了不同的实验方法。考马斯亮蓝法，作为蛋白质浓度检测的经典技术，其原理基于蛋白质与染料的结合反应，进而通过光吸收的差异来定量。这一方法的精妙之处不仅在于其简单快速，更在于它对蛋白质浓度的准确测定，为科研工作提供了有力的工具。
考马斯亮蓝法（Bradfordassay）是一种常用的蛋白质浓度测定方法，它具有以下优点：
高灵敏度：考马斯亮蓝法相对于其他蛋白质测定方法，如Lowry法，具有更高的灵敏度，能够检测低至微克级别的蛋白质含量