第4节蛋白质工程的原理和应用;任务一：探索速效胰岛素合成过程，归纳蛋白质工程的思路;【资料】1978年，科学家利用基因工程技术，生产出首个与人胰岛素序列完全相同的胰岛素产品。1982年，第1种重组人胰岛素获得批准。人胰岛素逐渐取代动物胰岛素被应用于临床。天然胰岛素见效慢，是因为天然胰岛素制剂往往以二聚体或六聚体的形式存在，需要经历长时间才能解离为单体，发挥作用。;思考1：

（2）基因工程的实质？;;天然胰岛素B链部分氨基酸序列：;思考2：（3）改造天然胰岛素（蛋白质）的思路是什么？;思考3：（1）若定点突变位点在端点需要几种引物？

（2）若定点突变位点在中间，需要的引物长度与突变位点在端点所需引物的长度有何区别？

获得所需较长引物的思路？

然后如何使用引物对基因的中间序列定点突变？

（3）还有其它方法对基因中间的碱基定点突变吗？;重叠延伸PCR技术进行定点突变：;;以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。;思考4：如何确定一个操作过程是基因工程技术还是蛋白质工程技术？;比较项目;任务二：应用蛋白质工程思路解决实际问题;【资料】在细菌体内导入荧光蛋白基因，用发出不同颜色荧光的细菌“画”出美妙图案。

科学家解析了水母绿色荧光蛋白的晶体结构，利用计算机进行辅助设计，将绿色荧光蛋白发光基团正下方的第203位的苏氨酸替换为酪氨酸，从而获得了一种新的绿色荧光蛋白的衍生物——黄色荧光蛋白。;思考6：

（1）怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？

请写出相应的碱基序列。;第一个

碱基;丙氨酸

GCU

GCC

GCA

GCG;思考6：（3）确定目的基因的碱基序列后，怎样才能改造目的基因。;【资料】干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病，但在体外保存却相当困难。;【蛋白质工程】通过改造_____，将小鼠抗体上结合抗原的区域（即可变区）“嫁接”到人的抗体（即恒定区）上，经过这样改造的抗体诱发的强度???会降低很多。;三、蛋白质工程的应用;教材p95异想天开;T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，但是它在温度较高时容易失去活性。为了提高T4溶菌酶的耐热性，科学家首先对影响T4溶菌酶耐热性的一些重要结构进行了研究。然后以此为依据对相关基因进行改造，使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸。于是，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，T4溶菌酶的耐热性得到了提高。

1.这项工作属于什么工程的范畴？

2.在该实例中引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是什么？

3.如果要将该研究成果应用到生产实践，还需要做哪些方面的工作？