第1节重组DNA技术的基本工具;三DNA连接酶---分子缝合针;DNA连接酶的作用展示1;DNA连接酶可以把平末端之间的缝隙“缝合”起来;DNA连接酶可连接双链DNA中的两条单链缺口，但不能连接两条”游离“单链DNA片段!

;将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键;旁栏思考（P72）：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？;;项目;E.coliDNA连接酶;1.根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;图甲;用DNA连接酶处理后会出现哪些产物？(只考虑两两结合);;1.选用下图载体将目的基因导入细菌中并将含有目的基因的细菌

筛选出来。;DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。

;(二)材料用具;2试剂;(三)方法步骤;取材研磨;DNA析出;实验组;二苯胺试剂鉴定呈现蓝色说明实验基本成功；如果不呈现蓝色，可能的原因有所提取的DNA含量低，或者在实验操作过程中出现了失误等。;为了提纯DNA，某同学提出以下实验方案，请分析原因：;1.如果选用鸡血细胞进行实验，如何快速破碎细胞？;DNA粗提取与鉴定实验成功的关键

(1)破碎细胞应彻底充分。

(2)对提取的含杂质较多的DNA进行提纯时，所用的酒精必须经过充分

预冷后才能使用。

(3)实验过程中搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，并

沿一个方向搅拌以便获得较完整的DNA分子。

(4)由于玻璃表面带电荷，DNA易被吸附于玻璃表面，故实验中应尽量

不使用或少使用玻璃器皿，这样可以提取到较多的DNA。

(5)二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。;1.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题：;(3)步骤①的目的是，

其依据的原理是。;一、概念检测;2.有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶speⅠ进行切割，B片段分别用限制酶HindⅢ,XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。

(1)哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶speⅠ切割A片段产生的DNA片段相连接？为什么？

(2)不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端，这在基因工程操??中有什么意义？