ICS65.020.20
CCSB05
DB23
黑龙江省地方标准
DB23/TXXXX—XXXX
大豆根瘤菌竞争结瘤能力与固氮效果评价
技术规程
XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
黑龙江省市场监督管理局发布
DB23/TXXXX—XXXX
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起
草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由黑龙江省农业农村厅提出。
本文件起草单位：黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源研究所、哈尔滨市芮煊科技有限公司。
本文件主要起草人：王爽、赵文博、孙磊、金品娇、郝小雨、李伟群、陈雪丽、万书明、刘凯。
I
DB23/TXXXX—XXXX
大豆根瘤菌竞争结瘤能力与固氮效果评价技术规程
1范围
本文件规定了大豆根瘤菌竞争结瘤能力、有效根瘤、无效根瘤和固氮效率的术语和定义，大豆根瘤
菌的竞争结瘤能力的测定与固氮效果的评价方法。
本文件适用于外源接种大豆根瘤菌的效果评价。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求
GB/T19495.3-2004转基因产品检测核酸提取纯化方法
NY/T2066-2011微生物肥料生产菌株的鉴别聚合酶链式反应（PCR）法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
占瘤率
是筛选不同根瘤菌与豆科植物宿主高效匹配效果的一个重要指标。
3.2
竞争结瘤能力
根瘤菌能够在宿主豆科植物上形成根瘤，而且它在其他根瘤存在的情况下，也能于相同的豆科植物
结瘤的能力，叫做竞争结瘤能力。
3.3
固氮效率
接种的待测菌株处理与未接种处理相比，收获的大豆籽粒总氮量增加。
4结瘤能力评价
4.1一般要求
实验室操作人员应具备良好的分子生物学专业技能，操作熟练。有毒、有害、废弃物的处理及安全
防护应符合GB/T19495.2的要求。
4.2原理
1
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利用分子标记方法获得菌株基因组指纹图谱并利用图谱统计其根瘤菌菌株的占瘤率，以此评价供试
菌株的竞争结瘤能力。
4.3主要材料与用具
铁锹、小铲、镊子、记号笔、塑料袋、剪刀、冰盒、小型离心机、微量可调移液器及对应的无菌
Tip头、1.5mL无菌离心管、振荡培养箱（摇床）、静置培养箱、高压蒸汽灭菌锅、分光光度计、细菌
基因组DNA提取试剂盒、超净工作台、PCR仪、电