第1节

重组DNA技术的基本工具

;我国是棉花的生产和消费大国，但棉花种植中易受虫害，其中以棉铃虫最为主，可以使棉花产量减少三分之一，甚至绝收。;基因工程;【问题1】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？;【问题2】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？;思考：DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。;1、病毒入侵真核生物会被免疫系统攻击，细菌面对噬菌体时如何自保？;3、为什么限制性内切核酸酶不剪切细菌本身的DNA？;（1）来源：;（5）作用特点：;（6）限制酶的识别序列：;（1）实例1——EcoRⅠ限制酶切割

*EcoRⅠ识别序列为GAATTC

*EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键;BamHⅠEcoRⅠ__________________________

HindⅢBglⅡ_________________________;2.请判断：以下黏性末端是由种限制酶作用产生的。;--ATGCATGCAT……CCAGAATTCCCA……TCCCTAAGAATTCCCATCCCAGATG……CATGCATCCATGC---

--TACGTACGTA……GGTCTTAAGGGT……AGGGATTCTTAAGGGTAGGGTCTAC……GTACGTAGGTACG---;2.作用：;5′;▲DNA复制中DNA聚合酶发挥作用;;1.根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;2、怎样才能将Bt蛋白基因送入棉花细胞呢？;质粒、噬菌体:;问题1：载体要与外源基因连接，需要具备什么条件？

问题2：要使携带的外源基因在受体细胞中稳定存在，载体需要具备什么条件？

问题3：我们用肉眼看不到载体是否进入受体细胞，为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？;有标记基因的存在，可用含青霉素的培养基鉴别。

不能被酶切破坏

便于重组DNA筛选与鉴定;5、标记基因的筛选原理;如何提高筛选的准确性?;;“分子手术刀”;;;DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菜花和猪肝等。;称取洋葱，切碎，放入研钵，倒入研磨液，充分研磨。;;;实验组;（1）你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？