?基于GCMS靶向代谢组学的方法开发及应用解螺旋|知识金牌

解螺旋 | 陪伴医生科研成长知识金牌01相关知识介绍02靶向定量方法流程重点介绍03案例分析CONTENTS课程目录

相关知识介绍01

知识金牌GCMS相关原理分离检测原理：利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等理化性质的不同来进行分离，然后进入质谱检测器进行检测的过程进样系统气化分离系统分离检测系统检测检测系统离子源检测器质量分析器解螺旋|陪伴医生科研成长离子源：EI电子轰击离子源

知识金牌气质联用适用范围化合物性能小分子易挥发热稳定低极性应用氨基酸类化合物精油，香料等化合物小分子糖类化合物短链脂肪酸类化合物醛、酮、醇类化合物有机酸类化合物解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌靶向定量的要求解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌GCMS靶向定量方法基本流程资料查询仪器方法前处理方法方法验证目标化合物的理化性质浓度水平前处理方法仪器分析方法质谱条件气象方法前处理方法（液液萃取）衍生化考察方法的准确度，重复性，检出限，定量限，线性范围等解螺旋|陪伴医生科研成长

靶向定量方法流程重点介绍02

知识金牌代谢物提取解螺旋|陪伴医生科研成长提取方法遵循相似相溶原理:利用目标化合物在不同溶剂中的溶解度或分配系数的差异，使化合物从生物基质中提取出来。常用溶剂：甲醇、丙酮、乙腈、正己烷、氯仿。对于固态样品：将固体样品（组织、细胞等）进行研磨、超声等方法破碎后采用溶剂萃取。对于液态样品：将液体样品（血清、尿液等）与不相溶的溶剂混合，利用溶质（代谢物）在不同液体中溶解及分配系数的不同而分离萃取。

代谢物纯化与富集 知识金牌目的：去除蛋白质、核酸、盐或者干扰目标代谢物检测的其他代谢物；提高待测物质的灵敏度和检测限。有机溶剂沉淀超滤高速离心固相萃取纯化氮吹冷冻干燥旋转蒸发浓缩固相萃取富集解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌衍生化目的降低待测物的沸点改善待测物的色谱质谱行为提升待测物的热稳定性提升代谢物的灵敏度有标准的谱库优势 ?改善样本的分离效果不足操作较为繁琐衍生化试剂对仪器以及实验员都有一定的损害硅烷化试剂酯化试剂烷基化试剂解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌气相色谱方法解螺旋|陪伴医生科研成长气相方法的优化：即分离条件优化，目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。优化参数：改变柱温、载气流速；当改变二者仍达不到基线分离的目的时，就应该更换更长的色谱柱，甚至更换不同固定相的色谱柱，因为在GC中，色谱柱是分离成败的关键。

知识金牌MS分析方法：FullScanSIMSIM/MRMSCAN解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌定量方法---外标法（常用）外标法：用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌定量方法---内标法内标法：是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌内标的选择解螺旋|陪伴医生科研成长理化性质与待测物相近在样品中不存在且不与样品中组分发生化学反应不与仪器设备（色谱柱）发生反应目标物的同位素标记物是最常用的内标物质外源类似物

知识金牌方法学验证解螺旋|陪伴医生科研成长灵敏度（检出限（S/N≥3）；定量限（S/N≥10）） 精密度（日内精密度，日间精密度，仪器方法稳定性，重现性）准确度（实际值与计量值之间的偏差，加标回收率）线性（标准曲线，线性相关性）

知识金牌方法验证学指南解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌灵敏度（Sensitivity）解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌准确度（Accuracy）解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌精密度（Precision）解螺旋|陪伴医生科研成长

知识金牌线性（Linearity）解螺旋|陪伴医生科研成长

案例介绍03

解螺旋 | 陪伴医生科研成长知识金牌实例分析：粪便样本中7种短链脂肪酸定量检测资料查询脂肪酸提取标准品（高、中、低）溶剂空白衍生化上机数据预分析脂肪酸提取标准品（7-9点浓度）QC样本衍生化方