二氧化铈纳米微粒过氧化物酶活性及其
在葡萄糖检测中的应用研究
1引言
葡萄糖是糖尿病诊断的一项重要生化指标.糖尿病是由于血液
中的葡萄糖不能得到有效利用,从而在血液中积累并导致一些并
症,如失明、肾脏病、心脏病及神经损伤等.迄今尚无治愈糖尿病的
有效方法.因此,准确检测血液中葡萄糖含量对于糖尿病的治疗和控
制非常必要.目前,各种方法如酶法、比色法和色谱法等已广泛用于
葡萄糖测定.在这些方法中,由于选择性好,酶法已得到更广泛应用.
然而,天然酶不稳定,而且价格昂贵、制备复杂.
2实验部分
2.1试剂
所有化学品均为分析纯,水为去离子水.3,3prime;,5,5prime;-四
甲基联苯胺(TMB)、辣根过氧化物酶(HRP,EC1.11.1.17,
300U/mg)、葡萄糖氧化酶(GOD,EC1.1.3.4.47,200U/mg)和5,5-二甲基
-1-吡咯啉-N-氧化物(DMPO)购自Sigma公司,保存于冰箱中(4℃)备
用;硝酸铈(III)、PAA、氨水(30%)、H2O2(30%)、磷酸氢二钠、磷酸二氢
钠、硫酸、葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖等均购自国药集团化学试剂
1
有限公司(上海,中国);超滤管(截留分子量为30和5kDa)购自
Millipore公司(Billerica,MA01821,美国);透析袋(截留分子量为
8000~14000Da)购自上海绿鸟科技发展有限公司(上海,中国);血样
来自重庆市某医院.
2.2仪器
UV-2450型UV-Vis分光光度计(岛津,日本);TPS-7000型ICP
单道扫描原子发射光谱仪(北京谱析通用仪器有限责任公司,北京,
中国);ZetasizerNanoZS90型电位仪(Malvern,英国);XSAM-800型X
射线光电子能谱仪(KRATOS,英国);傅里叶变换红外光谱仪(Nicolet
170SX,Madison,WI,美国);电子顺磁共振(EPR)光谱仪器(ESP300E,
Bruker,德国);拉曼光谱仪(RFS100/S,Bruker,德国);TGL-20M高速台
式冷冻离心机(湘仪离心机仪器有限公司,长沙,中国).
2.3实验方法
2.3.1CeO2NPs的合成及表征
CeO2NPs的制备按文献方法进行[31],具体步骤为:将5m
Ce3+(1.0mol/L)与10mLPAA(0.05mol/L)混合后,在搅拌条件下逐滴
加入到30m浓氨水(30%)中,继续搅拌24h.将所得溶液于4000
r/min离心30min后,上层清液用截留分子量为30kDa的超滤管进
行超滤,再用透析袋透析2d即得CeO2NPs,其浓度用铈元素含量
2
(IC