生物技术
Biotechnology
第二章基因工程
（GeneEngineering）;基因工程概念：
应用人工方法把生物的遗传物质（DNA）分离出来，在体外进行切割、拼接和重组。然后将重组的DNA导入某种宿主细胞或个体，从而改变它们的遗传品性；或者使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达，以获得基因产物（多肽或蛋白质）。;;第一节基因工程理论的研究基础
第二节基因工程基本技术路线
第三节常用的工具酶和载体
第四节目的基因片段的获取
第五节目的基因导入受体细胞
第六节克隆子的筛选和鉴定
;第一节基因工程理论的研究基础;;基因工程研究的理论依据：;第二节基因工程的一般步骤;第三节常用的工具酶和载体;(一)限制性核酸内切酶
（Restrictionendonuclease）;（2）限制性核酸内切酶种类;根据分离此酶微生物的学名，一般取3个字母。
第一个字母大写该微生物属名前的第一个字母
第二、三个字母小写该微生物种名前的2个字母
第四个字母大写有变种或品系的第一个字母
罗马字母Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ从一种微生物中发现了几种限制酶，按发现顺序排列
如EcoRⅠ是指从大肠杆菌（Escherichiacoli）R株分离得到的第一种限制酶。
;HindIII;;;;常用的限制性内切酶;(6)常用的酶切方法：
单酶切
双酶切
部分酶切：底物浓度低，识别序列的甲基化，酶用量不足，反应时间不够以及反应缓冲液;（二）DNA连接酶;(1)DNA片段之间的连接;（c）DNA片段末端修饰后进行连接：
核酸外切酶：切成平末端
末端转移酶：修饰成互补黏性末端
碱性磷酸酶：将5’-P修饰成5’-OH
（d）DNA片段加连杆后连接
人工合成连杆或衔接头;;;（三）DNA片段末端修饰酶;（四）DNA聚合酶;小结：
1.基因克隆（DNA重组）的基本流程
2.常用工具酶：限制性核酸内切酶及其作用；DNA连接酶种类及其作用；DNA末端修饰酶（末端转移酶、核酸外切酶、碱性磷酸酶等及其作用）;谢谢聆听！