关于体外受精和早期胚胎发育PPT第1页,共15页,星期日,2025年,2月5日目的:良种牛快速大量繁殖第2页,共15页,星期日,2025年,2月5日精子采集精子获能卵子采集卵子体外培养体外受精早期体外胚胎培养本地牛(子宫)试管牛♂♀一、试管动物技术概念:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术第3页,共15页,星期日,2025年,2月5日一、试管动物技术试管动物技术的三步第一步:卵子和精子的成熟和受精第二步:培养为早期胚胎第三步:胚胎移植第4页,共15页,星期日,2025年,2月5日阅读教材,思考:卵母细胞采集的方法有哪些?采集的卵母细胞都能直接和获能的精子受精吗?2、收集精子的方法有哪些?体外使精子获能的方法有哪些?3、一般在什么溶液中完成受精过程?4、5、发育培养液的成分有哪些?胚胎早期培养的目的?1、教材72页图3-14中,卵母细胞培养的目的?精子离心处理的目的?(培养成熟,至减Ⅱ中期)(分离精子,便于获能处理)第5页,共15页,星期日,2025年,2月5日二、试管动物技术的过程1、体外受精⑴卵母细胞的采集和培养采集方法:①超数排卵:用促性腺激素处理,从输卵管中冲取卵子。注意:卵子能直接与获能的精子在体外受精。常用对象:实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等注意:要在体外经人工培养成熟后,才能与精子结合完成受精。②刚屠宰母畜的卵巢中取卵或活体动物卵巢中取卵。常用对象:大家畜或大型动物,如牛等第6页,共15页,星期日,2025年,2月5日1、体外受精⑵精子的采集和获能收集的方法:获能的方法:假阴道法、手握法、电刺激法培养法:化学诱导法:如:啮齿动物、家兔和猪等如:牛、羊等家畜放入人工配制的获能液中放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中第7页,共15页,星期日,2025年,2月5日卵巢卵母细胞新鲜或解冻的精液卵母细胞培养精子离心处理MⅡ期卵母细胞精子获能处理获能精子体外受精受精卵培养在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程⑶受精受精标志:透明带与卵细胞膜之间观察到两个极体第8页,共15页,星期日,2025年,2月5日2、胚胎的早期培养培养液成分:早期培养的目的:两盐、两素、两酸、血清等检查受精状况和受精卵的发育能力第9页,共15页,星期日,2025年,2月5日牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段试管婴儿:8-16个细胞阶段胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。3、胚胎移植不同动物胚胎移植时间不同。第10页,共15页,星期日,2025年,2月5日体外受精早期胚胎培养卵母细胞的采集精子的获取受精:条件:培养液成分:假阴道法手握法电刺激法方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵,从输卵管中冲取卵子方法二:从屠宰母畜卵巢中采集方法三:直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞受精卵在发育培养液中培养无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等获能的精子+培养成熟的卵子完成受精课内小结第11页,共15页,星期日,2025年,2月5日