第四节分光光度计的基本构造和使用流程一、基本构造光源单色器吸收池检测器显示0.575光源单色器吸收池检测器显示第31页，共59页，星期日，2025年，2月5日1、光源----有热辐射光源和气体放电光源两类要求：在可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在350～1250nm。它是比色计和分光光度计的光源。紫外区：氢、氘灯。发射150～400nm的连续光谱。它是紫外分光光度计的光源。仪器自动控制或手动选择单色光波长。第32页，共59页，星期日，2025年，2月5日常用的色散元件有棱镜和光栅两种。棱镜有玻璃和石英两种材料。它们的色散原理是依据不同的波长光通过棱镜时有不同的折射率而将不同波长的光分开。由于玻璃可吸收紫外光，所以玻璃棱镜只能用于350~3200nm的波长范围，即只能用于可见光域内。石英棱镜可使用的波长范围较宽，可从185~4000nm，即可用于紫外、可见和近红外三个光区。光栅是利用光的衍射与干涉作用制成的，它可用于紫外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、几乎均匀一致的分辨能力。2、单色器单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色光的光学装置，其主要功能：产生光谱纯度高的光波且波长在紫外可见区域内任意可调。通常由准直镜（聚光镜）、色散元件、狭缝组成。第33页，共59页，星期日，2025年，2月5日样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。（注意；每次使用要清洗干净，或者润洗。）3、吸收池第34页，共59页，星期日，2025年，2月5日利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。4、检测器光电池----用半导体材料制成的光电转换器。用得最多的是硒光电池。第35页，共59页，星期日，2025年，2月5日光电管的工作原理---将光强度信号转换成电信号当一定强度的光照射到阴极上时，光敏物质要放出电子，放出电子的多少与照射到它的光的大小成正比，而放出的电子在电场的作用下要流向阳极，从而造成在整个回路中有电流通过。而此电流的大小与照射到光敏物质上的光的强度的大小成正比。这就是光电管产生光电效应的原理。光电倍增管----非常灵敏的光电器件，可以把微弱的光转换成电流。其灵敏度比前2种都要高得多。它是利用二次电子发射以放大光电流，放大倍数可达到108倍。第36页，共59页，星期日，2025年，2月5日5、信号指示系统（检流计、数字显示或自动记录装置）很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处理。第37页，共59页，星期日，2025年，2月5日二、分光光度计类型1、简易分光光度计721型分光光度计722型分光光度计第38页，共59页，星期日，2025年，2月5日2、紫外-可见分光光度计第39页，共59页，星期日，2025年，2月5日紫外分光光度法-----利用被测物质的分子、离子以及有机化合物中的官能团（主要为具有不饱和键和未成对电子的基团。如：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—）对紫外光选择性吸收的特性而建立起来的方法。第40页，共59页，星期日，2025年，2月5日1、光源钨灯或卤钨灯——可见光源350~1000nm。氢灯或氘灯——紫外光源200~360nm。第41页，共59页，星期日，2025年，2月5日2、吸收池玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区。石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区。要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）第42页，共59页，星期日，2025年，2月5日仪器分析第一章分光光度分析关于分光光度分析第1页，共59页，星期日，2025年，2月5日学习要求1、掌握紫外-可见分光光度分析的特点、基本原理、测定条件的选择、测定实验技术、定性和定量分析方法及有关术语。2、掌握紫外-可见分光光度计的结构，使用、维护和保养方法。第2页，共59页，星期日，2025年，2月5日基于物质光学性质而建立起来的分析方法称之为光学分析法，分为:光谱分析法和非光谱分析法（如比色法、旋光测定法）。光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。光学分析法概述第3页，共59页，星期日，2025年，