T/NAIAXXX—2021
团体标准
T/NAIAXXX—2021
饲料中真蛋白的测定
凯氏定氮法
Determinationoftrueproteininfeedstuffs,Kjeldahlmethod
2021-XX-XX发布2021-XX-XX实施
宁夏化学分析测试协会发布
T/NAIAXXX—2021
饲料中真蛋白的测定
凯氏定氮法
1范围
本标准规定了饲料中真蛋白的测定方法，其中包括原理、试剂和溶液、仪器设备、分析
步骤、结果计算及精密度。
本操作方法适用配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中真蛋白的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的应用文件，仅注日期的版本适
用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
GB/T20195-2006动物饲料试样的制备。
GB/T6432-2018饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法。
3原理
样品在水溶液中，加入过量硫酸铜，在碱性条件下，纯蛋白被氢氧化铜沉淀，用水洗去
水溶性含氮物，沉淀部分按粗蛋白的测定方法测定其含氮量。
4试剂和溶液
除非另有说明外，本方法均使用符合国家标准的分析纯试剂，分析用水为GB/T6682规
定的三级水。
4.1五水硫酸铜（CuSO·5HO)。
42
4.2浓硫酸（HSO）含量为98%，无氮。
24
4.3氢氧化钠（NaOH）。
4.4硫酸钠（NaSO）。
4
4.5硼酸（HBO）。
33
4.6硫酸铵:分析纯，干燥。
4.7溴甲酚绿。
4.8甲基红。
4.9蔗糖。
4.1010%硫酸铜溶液
称取五水硫酸铜10g用水溶解，转移至100mL容量瓶中定容至刻度。
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4.112.5%氢氧化钠溶液
称取2.5g氢氧化钠用水溶解，转移至100mL容量瓶中定容至刻度。
4.12催化剂
0.4g五水硫酸铜，6g硫酸钠，均为分析纯，磨碎混匀。
4.1340%的氢氧化钠溶液
称取400.0g氢氧化钠溶于水中，并稀释至1000mL。
4.1420g/L硼酸溶液
称取20.0g硼酸溶于水中，并稀释至1000mL。
4.15混合指示剂
称取0.50g溴钾酚绿（CHBrOS)及0.10g甲基红（CHNO),用少量95%乙醇研磨至
211445151532
完全溶解，用95%乙醇定容至100mL,该指示剂贮存期不超过2个月。
4.160.02mol/L盐酸或硫酸标准溶液
按GB/T601制备
4.170.1mol/L盐酸或硫酸标准溶液
按GB/T601制备
5仪器设备
5.1实验室用样品粉碎机。
5.2分样筛:孔径0.45mm(40目