第四节基因工程特点：可设计性、稳定性、远缘性、风险性一、基因工程的概念和特点定义：是指人们利用分子生物学的理论和技术，自觉设计、操纵、改造和重建细胞的遗传核心-基因，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，以最大限度地满足人类活动的需要。第55页，共95页，星期日，2025年，2月5日获得目的基因选择基因载体体外重组外源基因导入（细菌、植物、动物、基因枪）筛选和鉴定工程菌或工程细胞的大规模培养二、基因工程的基本操作第56页，共95页，星期日，2025年，2月5日第五节菌种的衰退、复壮和保藏性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产或科研都无法正常进行。影响微生物菌种稳定性的因素：a）变异；b）污染；c）死亡。第57页，共95页，星期日，2025年，2月5日一、菌种的衰退与复壮菌种衰退的原因：大量群体中的自发突变纯菌种自发突变不纯菌种突变个体传代增殖原始个体衰退菌种衰退：菌种出现或表现出负变性状菌种衰退的具体表现：1、原有的形态、性状变得不典型了2、生长速度变慢，产生孢子变少3、代谢产物生产能力下降4、致病菌对宿主的侵袭力的下降5、对外界不良条件包括低温、高温等抵抗力下降第58页，共95页，星期日，2025年，2月5日1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有原有典型性状的菌种。a）纯种分离；b）通过寄主体进行复壮；c）淘汰已衰退的个体2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种维护工作中不断筛选“正变”个体。菌种的复壮：第59页，共95页，星期日，2025年，2月5日二、防止衰退的措施1）减少传代次数；2）创造良好的培养条件；3）利用不易衰退的细胞后代4）采用有效的菌种保藏方法；第60页，共95页，星期日，2025年，2月5日基本方法培养基传代培养（斜面、平板）寄主传代培养低温（液氮、低温冰箱）干燥（沙土管、真空干燥）生活态休眠态第61页，共95页，星期日，2025年，2月5日三、菌种保藏目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究、生产、交换之用基本原则：1、挑选典型菌种的优良纯种2、尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体3、创造有利于休眠的保藏环境（如干燥、低温）4、尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重要的微生物菌株第62页，共95页，星期日，2025年，2月5日第63页，共95页，星期日，2025年，2月5日遗传变异和育种物质基础：DNA或RNA存在的部位和方式质粒定义构型优点种类基因突变：定义和特点以及分类遗传变异和育种DNA损伤的修复机制诱变育种的原则诱变育种的基本过程知识结构基因重组和杂交育种原核生物的基因重组真核微生物的基因重组基因工程概念基本操作菌种的衰退、复壮和保藏第64页，共95页，星期日，2025年，2月5日1、已知DNA的碱基序列为CATCATCAT，什么类型的突变可使其突变为：CTCATCAT()A.缺失B.插入C.颠换D.转换2、已知DNA的碱基序列为CATCATCAT，什么类型的突变可产生如下碱基序列的改变：CACCATCAT？()A.缺失B.插入C.颠换D.转换3、不需要细胞与细胞之间接触的基因重组类型有()A.接合和转化B.转导和转化C.接合和转导D.接合4、转化现象不包括()A.DNA的吸收B.感受态细胞限制修饰系统D.细胞与细胞的接触5、以下碱基序列中哪个最易受紫外线破坏？A.AGGCAAB.CTTTGAC.GUAAAUD.CGGAGA第65页，共95页，星期日，2025年，2月5日6、一个大肠杆菌(E.coli)的突变株，不同于野生型菌株，它不能合成精氨酸，这一突变株称为：A.营养缺陷型B.