ICS11.220
CCSB41
团体标准
T/CVMAxxx—xxxx
实验动物血液中牛磺酸含量测定高效液相
色谱法
Determinationoftaurinecontentinanimalblood-highperformance
liquidchromatographymethod
征求意见稿
xxxx-x-xx发布xxxx-x-xx实施
中国兽医协会发布
T/CVMAxxx—xxxx
实验动物血液中牛磺酸含量测定高效液相色谱法
1范围
本文件规定了实验动物血液中牛磺酸含量的高效液相色谱测定方法。
本文件适用于实验动物小鼠、大鼠、兔、豚鼠、地鼠、犬和猴、猫血液中牛磺酸含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中的牛磺酸用乙腈提取后,离心,上清液经2，4－二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生后,高效液相
色谱仪测定，外标法计算其含量。
5试剂和材料
5.1除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的蒸馏水、去离子水或相当纯
度的水。
5.2乙腈(CHCN):色谱纯。
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5.32，4二硝基氟苯（DNFB，(O2N)2C6H3F）。
5.4无水乙酸钠。
5.5冰乙酸。
5.6碳酸氢钠。
5.7磷酸二氢钾。
5.8氢氧化钠。
5.9碳酸氢钠溶液（0.5mol/L）:称取碳酸氢钠21g，加水至500mL。
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5.10DNFB衍生试剂（1%）:取DNFB250μL，加乙腈至25mL。
5.11磷酸盐缓冲溶液(pH7.0):取磷酸二氢钾6.8g，加0.1mol/L的氢氧化钠291mL，加水至
1000mL，pH为7.0。
5.12乙酸钠溶液(pH7.0)：取无水乙酸钠4.1g，加水至1000mL，加乙酸10μL，pH为7.0。
5.13牛磺酸标准品：CAS号：107-35-7，纯度≥99.0%。
5.14牛磺酸标准储备液（1000μg/mL）：称取牛磺酸标准品25mg（精确至0.00001g）于25mL棕
色容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀，2~8℃保存，有效期7天。
5.15牛磺酸标准标准工作液：分别准确移取牛磺酸标准储备溶液（5.13）适量，用水稀释并定容，
配制成浓度分别为0.60μg/mL、1.2μg/m、2.4μg/m、6.0μg/m、12.0μg/mL的牛磺酸标准工作液。现用
现配。
5.16水相滤膜：孔径0.45μm。
5.17有机相滤膜：孔径0.22μm。
6器材和设备
6.1高效液相色谱仪，配有紫外可见检测器或二极管阵列检测器，配有柱温箱（控温范围为室温至
50℃)。
6.2电子天平，感量0.0001g。
6.3涡旋振荡器。
6.4超声波清洗