ICS11.220
CCSB41
团体标准
T/CVMAXXXXX—XXXX
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大熊猫血涂片操作技术规程
TechnicaloperatingproceduresforbloodSmearofGiantPanda
征求意见稿
XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
目录
中国兽医协会发布
大熊猫血涂片操作技术规程
1范围
本文件规定了血涂片制备、染色和质量评估、记录与报告的方法。
本文件适用于全国大熊猫饲养机构的兽医人员进行血涂片的制备和染色。血涂片主要用于血细胞
形态学检查。当大熊猫出现不明原因的发热、怀疑有血液寄生虫感染、血细胞计数和分类结果出现异常
时需要进行血细胞形态学检查时，需要制备标准化的血涂片用于血细胞形态学分析。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义、缩略词
下列术语和定义、缩略词适用于本文件。
3.1
血细胞形态学检查Bloodcellmorphologicalexamination
对血液有形成份质量的检查和数量的评估，主要包括对红细胞、白细胞及血小板的大小、形态、染
色及结构等方面的检查。
3.2
血涂片Bloodsmear
血细胞形态学检查的基本方法，将一滴血液样本制成薄层血膜，染色后在显微镜下观察有无细胞数
量、形态异常，有无异常病原微生物等结构，以提供诊断信息。通过将被检血液制备成涂片，经过染色
后在显微镜下观察其形态，为疾病的筛查与诊断提供依据。
3.3
抗凝剂Anticoagulant
利用物理或化学方法，去除或抑制血液中的凝血因子，防止血液凝固的化学试剂或物质。
3.4
EDTA-K2
ethylenediaminetetraaceticaciddipotassiumSalt，乙二胺四乙酸二钾。
4血涂片的制备
血涂片按照厚薄可分为薄血膜涂片和厚血膜涂片，薄血膜涂片一般用于细胞形态观察，厚血膜涂片
一般用于寄生虫筛查。按照制备方式可分为人工制备血涂片和全自动涂片法。
4.1人工制备血涂片操作步骤
1
4.1.1准备
4.1.1.1设备与试剂准备
载玻片（清洁、无划痕）、推片（边缘光滑）、抗凝血液样本（如EDTA抗凝血）、染色剂（瑞氏染色、
吉姆萨染色等）、甲醇（用于固定）、光学显微镜（配备油镜）、蒸馏水或缓冲液（用于染色）、吸水纸
4.1.1.2人员防护准备
操作人员需穿戴手套、口罩、实验服，避免直接接触血液样本。操作区域应清洁、无尘，避免样本
污染。
4.1.2取样
轻轻摇动抗凝管，使血液混匀。用微量移液器或毛细管吸取5-20μl血液。
4.1.3滴样
将血滴滴在载玻片一端，距边缘约1cm处或者整片的3/4处的中央。
4.1.4推片
用推片以30-45度角接触血滴，待血液沿推片边缘展开。快速、平稳地向前推成薄层，形成舌形或
椭圆形的血膜。推片时力度均匀，避免细胞堆积或血膜过厚。
推片时需注意：载玻片表面须洁净、干燥、无杂质，且不可重复使用；盖玻片边缘应平滑、无毛糙。
推片时，勿在垂直方向上对推片施力，也不可过早离开载玻片表面；应根据血液浓稠程度调整推片与载
玻片的角度