邻二氮菲分光光度法测定微量铁

学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。掌握722型可见分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验目的

根据朗伯－比耳定律：A=εbc。当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。广泛用于无机物和有机物的定性和定量分析。邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验原理

邻二氮菲亦称邻菲咯啉（简写phen），是光度法测定铁的优良试剂。在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验原理

１．仪器：722型分光光度计；1cm吸收池；10mL吸量管；25mL比色管(7个)。２．试剂：1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液；100μg·mL-1铁标准溶液；0.15%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液（新配）；1mol·L-1乙酸钠溶液；1mol·L-1NaOH溶液；6mol·L-1HCl（工业盐酸试样）。邻二氮菲分光光度法测定微量铁仪器试剂

１．准备工作：打开仪器电源开关，预热。调解仪器。２．测量工作：（以通过空白溶液的透射光强度为I0，通过待测液的透射光强度为I，由仪器给出透射比T，再由T值算出吸光度A值。）邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤

（1）吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol.L-1标准溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀，加入2.00mL0.15%邻二氮菲溶液，5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用1cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在440-560nm间，每隔10nm测量一次吸光度（在最大吸收波长处，每隔2nm），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤

数据举例如下：邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤波长（nm）440450460470480490494496498500吸光度0.2400.2700.2950.3250.3520.3750.3780.3800.3820.383波长（nm）502504506508510520530540550560吸光度0.3850.388.0.3900.3910.3980.4100.3700.2850.1690.085

邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤由作图可知最大吸收波长为518nm

（2）显色剂用量的选择：在6支比色管中，各加入2.00mL1.0×10-3mol.L-1铁标准溶液，1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀，分别加入0.10，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00mL0.15%邻二氮菲溶液，5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在光度计上用1cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，测吸光度，以吸光度和邻二氮菲体积作A-V图，得到显色剂最佳用量。数据记录举例如下：邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤邻二氮菲的体积（mL）0.100.501.002.003.004.00吸光度A0.0550.2450.3910.4350.4320.421

邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤由图可知，显色剂最佳用量为2.00mL0.15%邻二氮菲溶液。

（3）水样中铁含量的测定标准曲线的制作:在5支50mL比色管中，分别加入0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL100μg/mL铁标准溶液，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，2.00mL0.15%邻二氮菲溶液和5.0mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在518nm处，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，测吸光度A。邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验步骤

邻二氮菲分光光度法测定微量铁不能颠倒各种试剂的加入顺序。01最佳波长选择好后不要再改变。02每次测定前要注意调满刻度。03实验注意事项

小结722型分光光度计的使用二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理应用吸收定量进行定量分析

思考题绘制吸收曲线的时候，除了采用浓度做横坐标，可以采用其它参数做横坐标吗？如果可以，请举例说明。