3.探究pH对酶活性的影响。(1)反应原理(用反应式表示)。 (2)鉴定原理:pH影响酶的活性,从而影响氧气的生成速率,可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验O2的生成速率。(3)设计实验。 ①材料:宜选用过氧化氢和肝脏研磨液探究pH对酶活性的影响,而不选用淀粉和淀粉酶。因为调节pH值所营造的酸性环境会干扰斐林试剂(碱性)对淀粉水解的检测,且酸性环境下,淀粉还会水解,碱性环境会干扰碘液与淀粉的蓝色反应。自变量pH控制自变量将等量的氢氧化钠、盐酸和pH=7的缓冲液分别放入装有等量酶的试管中,进行对照实验因变量过氧化氢的分解速率检测因变量观察气泡产生的情况(或插入卫生香,观察复燃情况)对无关变量 进行控制溶液的量以及试管洁净度等保持相同 ②实验设计思路(包括自变量、如何控制自变量、因变量、如何检测因变量、怎样对无关变量进行控制、对照实验)。步骤试管1试管2试管3第一步加入2滴肝脏研磨液第二步1mLpH=7的缓冲液1mL盐酸溶液1mLNaOH溶液第三步加入2mLH2O2溶液第四步观察气泡生成速率(或插入卫生香,观察复燃情况)(4)进行实验。 (5)实验结果:氢氧化钠和盐酸两组无明显气泡产生(或卫生香不复燃),pH=7的缓冲液组有大量气泡产生(或卫生香复燃)。 (6)实验结论:酶的作用需要适宜的pH,pH偏高或偏低都会使酶活性降低。4.实验注意事项。 (1)在探究温度对酶活性的影响的实验中,不宜选择过氧化氢(H2O2)和过氧化氢酶作为实验材料,因为过氧化氢(H2O2)在常温常压下就能分解,加热条件下分解会加快,从而影响实验结果。 (2)在探究pH对酶活性的影响实验中,不宜选用淀粉和淀粉酶作为实验材料,因为在酸性条件下淀粉本身分解也会加快,从而影响实验结果。 (3)在探究温度对酶活性的影响的实验中,底物和酶溶液应先分别在预设的温度中保温一段时间后再混合,保证反应从一开始就是预设的温度。 (4)探究pH对酶活性的影响时,必须先调pH,然后再将反应物与酶混合,否则反应物会在未调节好pH的情况下就在酶的作用下发生反应,影响实验的准确性。另外,本实验中也可将过氧化氢酶溶液和过氧化氢溶液分别调至同一pH再混合,以保证反应开始便达到预设pH。 (5)探究pH对酶活性的影响时,不能用斐林试剂作指示剂,因为盐酸会和斐林试剂发生反应,使斐林试剂失去作用。 [典例](2024年广东广州一模)某兴趣小组开展对酶的特性的实验探究,在5支注射器中加入试剂的情况如下表所示。在注射器中反应产生的气体推动注射器活塞的同时用计时器记录时间,测定氧气产生速率。下列分析正确的是()加入试剂注射器编号123453%H2O22mL2mL2mL2mL2mL蒸馏水1mL----3.5%FeCl3-1mL---新鲜猪肝匀浆液-1mL--高温处理的猪肝液---1mL-多酶片溶液----1mL氧气产生速率/(mL·s-1)注:多酶片中含有淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶。A.从实验原则上分析,注射器1仅通过加入蒸馏水作为空白对照来控制变量B.若注射器1、4、5中氧气产生速率为0mL·s-1,则证明酶具有专一性C.注射器2、3的反应体系中氧气产生速率不等,但产生的氧气总量相等D.若要研究温度对酶活性的影响,应选取注射器4作为注射器3的对照 解析:从实验原则上分析,注射器1不仅通过加入蒸馏水作为空白对照来控制变量,加入相同体积的溶液也能达到控制变量的目的,A错误。虽然注射器5中加入的多酶片中含有淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶,但其不能催化H2O2水解;注射器4中加入的高温处理的猪肝液中H2O2酶失活,因此,若注射器1、4、5中氧气产生速率为0mL·s-1,不能证明酶具有专一性,B错误。注射器3的反应体系中有酶的催化,氧气产生速率比注射器2的快,但由于底物量相等,因此产生的氧气总量相等,C正确。若要研究温度对酶活性的影响,应选取注射器1、4作为注射器3的对照,D错误。答案:C组别123456棉花减重/g00.120.160.220.230.15温度/℃253545556575 【举一反三】 1.(2023年广州一模)纺织厂常用枯草杆菌生产的α淀粉酶除去织物中的淀粉。为探究α-淀粉酶