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文件名称:引物设计基本原则.pptx
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总页数:27 页
更新时间:2025-06-07
总字数:约2.61千字
文档摘要
引物设计基本原则演讲人:日期:
CONTENTS目录01特异性设计原则02引物长度与Tm值控制03GC含量与序列分布04二级结构规避策略05引物位置选择规范06验证与优化流程
01特异性设计原则
靶序列特异性验证使用BLAST工具将引物序列与目标基因组进行比对,确保引物与目标序列高度匹配。BLAST比对选取与目标序列特异性结合的引物,避免引物与基因组其他区域发生非特异性结合。引物筛选通过实验验证引物的特异性,如PCR扩增后进行测序验证。实验验证
避免非特异性结合区域引物浓度合理设置引物浓度,避免过高浓度导致非特异性结合。03避免引物自身形成二级结构或与靶序列形成非特异性结合的结构。02引物二