湿热灭菌（2）流通蒸汽灭菌法：利用100℃左右的水蒸汽进行消毒，一般采用流通蒸汽灭菌器（其原理相当于我国的蒸笼），加热15到39分钟，可杀死细菌繁殖体。消毒物品的包装不宜过大、过紧，这样以利于蒸汽穿透。凡不耐高温的物质，如糖类、明胶、血清、牛乳及鸡蛋等可用此方法灭菌。
第30页，共75页，星期日，2025年，2月5日湿热灭菌（3）间歇灭菌法：又称分段灭菌法。适用于不耐热培养基的灭菌。方法是：将待灭菌的培养基在100℃下蒸煮30-60min，以杀死其中所有微生物的营养细胞，然后置室温或20-30℃下保温过夜，诱导残留的芽胞萌发，第二天再以同法蒸煮和保温过夜，如此连续重复3天，即可在较低温度下达到彻底灭菌的效果。例如，培养硫细菌的含硫培养基就是应用间歇灭菌法灭菌，因为其中的元素硫经常规的高压灭菌(12l℃)后会发生熔化，而在100℃的温度下则呈结晶状。第31页，共75页，星期日，2025年，2月5日间歇灭菌法的注意事项：使用间歇法灭菌时必须在灭菌物里外都达到100℃后开始计算灭菌时间。间歇法灭菌时应在每次加热后，迅速降温，然后在室温放置24h，再第二次加热。如果降温慢，往往使未杀死的杂菌大量滋长，反面导致灭菌物变质，特别是包装过大时，靠近中心部分更易发生这种情况。第32页，共75页，星期日，2025年，2月5日湿热灭菌（4）巴氏消毒法（Pasteurization）：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。第33页，共75页，星期日，2025年，2月5日巴氏消毒法是一种低温消毒法，具体的处理温度和时间各有不同，一般在60-85℃下处理15-30min。具体的方法可分两类，第一类是较老式的，称为低温维持法，例如在63℃下保持30min可进行牛奶消毒；另一类是较新式的，称为高温快速法，用于牛奶消毒时只要在85℃下保持5min即可。但是巴氏消毒法不能杀灭引起Q热的病原体--伯氏考克斯氏体(一种立克次氏体)。第34页，共75页，星期日，2025年，2月5日湿热灭菌（5）高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。第35页，共75页，星期日，2025年，2月5日湿热灭菌压力蒸汽灭菌器分类：根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器。第36页，共75页，星期日，2025年，2月5日干热和湿热两者比较在同样的温度下，温热的杀菌效果比干热好，其原因有：①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，因较同一温度的干热空气中易于凝固。第37页，共75页，星期日，2025年，2月5日两者比较②温热灭菌过程中蒸气放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所要温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大，使深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好。第38页，共75页，星期日，2025年，2月5日高压蒸汽灭菌器的基本构造1.外锅或称“套层”，供贮存蒸汽用，连有用电加热的蒸汽发生器，并有水位玻管以标志盛水量。外锅的外侧一般包有石棉或玻璃棉绝缘层以防止散热。如直接使用由锅炉接入的高压蒸汽，则外锅在使用时充满蒸汽，作为内锅保温。2.内锅或称灭菌室，是放置灭菌物的空间．可配制铁蓖架以分放灭菌物。第39页，共75页，星期日，2025年，2月5日3.压力表内外锅各装一只，老式的压力表上标明三种单位：公斤压力单位(kg/cm2)，英制压力单位(1b/in2)和温度单位(℃)，便于灭菌时参照。现在的压力表用MPa表示。4.温度计可分为两种，一种是直接插入式的水银温度计，装在密闭的铜管内，焊插在内锅中．另一种是感应式仪表温度计，其感应部分安装在内锅的排气管内，仪表安装于锅外顶部．便于观察。第40页，共75页，星期日，2025年，2月5日5.排气阀一般外锅、内锅各一个，用于排除空气。新型的灭菌器多在排气阀外装有汽液分离器(或称疏水阀)．内有由膨胀盒控制的活塞。利用空气、冷凝水与蒸汽之间的温差控制开关，在灭菌过程中，可不断地自动排出空气和冷凝水。6.安全阀或称保险阀．利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自动放气减压。通常调在额定压力之下，略高于使用压力。安全阀只供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压