2.胚培养技术胚的发育对营养的要求有2个阶段，即：异养期：这一时期的幼小胚完全依赖胚乳和周围的母体组织提供营养。自养期：这一时期胚能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身的代谢作用合成其生长必需的物质，在营养上已可以完全独立。第63页，共89页，星期日，2025年，2月5日IAA(吲哚乙酸)NAA(萘乙酸)IBA(吲哚丁酸)2,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸)生长素作用强弱顺序：强弱第31页，共89页，星期日，2025年，2月5日概念：是一类具有促进细胞分裂和其他生理功能的物质总称。都为腺嘌呤的衍生物。在高等植物中普遍存在，特别是茎尖、根尖、未成熟的种子和生长着的果实等进行着细胞分裂的器官。细胞分裂素作用：①促进细胞分裂与扩大。②诱导芽分化，促进侧芽萌发，使茎增粗，抑制茎伸长。③抑制根的分化。（2）细胞分裂素类第32页，共89页，星期日，2025年，2月5日用量：mg/L级用法：溶于0.5mol/L稀HCl或稀NaOH，通常多用NaOH助溶。细胞分裂素常用种类：6-BA(6-苄基腺嘌呤)Kt(kinetin激动素)Zt(zeatin玉米素)第33页，共89页，星期日，2025年，2月5日Kt(激动素)6-BA(6-苄基腺嘌呤)Zt(玉米素)细胞分裂素作用强弱顺序强弱第34页，共89页，星期日，2025年，2月5日GA3（赤霉素）：最初从赤霉菌中提取到，能够引起水稻等植株徒长。在组织培养中有时使用，如用于匍匐茎的诱导。作用：通过调节生长素的含量实现促进细胞伸长的。促进幼芽伸长生长，促进不定胚发育成小植株打破休眠。多用GA3。赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响：当生长素/赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化。用量：mg/L级用法：易溶于水、乙醇，多用95％乙醇溶解储存。（3）赤霉素第35页，共89页，星期日，2025年，2月5日脱落酸（ABA）→因物种不同，能促进或抑制愈伤组织生长；乙烯→有催熟作用，大量积累易影响生长、分化，导致培养物早衰、落叶和玻璃化苗，应尽量排除之；5.另外：第36页，共89页，星期日，2025年，2月5日6.抗生物质种类：青霉素、链霉素、利福平、卡那霉素、庆大霉素等。浓度：5-20mg/L。作用：可防止菌类污染，主要抑制内生菌。多数需过滤灭菌第37页，共89页，星期日，2025年，2月5日7.活性炭目的：利用其吸附能力，减少一些有毒物质的影响。如：用于防止酚类物质污染引起组织褐化死亡。也能使培养基变黑，有利于某些植物生根。使用浓度：1-5g/L。它的颗粒大小决定着吸附能力：粒度越小，吸附能力越大；温度低吸附力强，温度高吸附力减弱，甚至不吸附。第38页，共89页，星期日，2025年，2月5日8.水作用：是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。注意：用蒸馏水，最好是重蒸馏水；以保持培养基成分的精确性。配制培养基母液时要用蒸馏水，大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良果。第39页，共89页，星期日，2025年，2月5日母液的定义将所用培养基配方的化学成分按一定的比例配成浓缩液。2.母液的种类（1）大量元素母液（2）微量元素母液（3）有机物母液（4）铁盐母液（5）激素母液二、配制培养基母液第40页，共89页，星期日，2025年，2月5日（1）大量元素原则上可以混在一起，但硫酸镁与氯化钙要单独配制，因为高浓度的Ca2+与Mg2+与磷酸盐混合，会产生不溶性沉淀。3.母液的配制配制方法：用天平称取药品，分别加入600-700ml蒸馏水中，再用磁力搅拌器搅拌，待第一种药品溶解，加入第二种药品，最后定容。或每一种药品分别溶解，然后混合，最后定溶。第41页，共89页，星期日，2025年，2月5日（2）微量元素用分析天平准确称取药品，分别溶解，依次混合，最后定容。有时KI单独配制。（3）铁盐母液易沉淀，需单独配制，一般配成硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）与乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA)的铁盐螯合剂。用少量蒸馏水将Na2-EDTA加热溶解后，再缓缓倒入FeSO4溶液充分搅拌并加热5分钟，使其充分螯合。第42页，共89页，星期日，2025年，2月5日(4)有机物母液分别称取药品，溶解，混合后加水定容。(5)激素母液必需单独配制，储存于冰箱。一般浓度为0.5-1mg/m