阿基瑞林合成条件的优化
阿基瑞林(Argireline，Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2)，又名
乙酰六胜肽-3，又被称为类肉毒杆菌素，是模仿SNAP-25蛋白N端6
个氨基酸的寡肽。阿基瑞林为高端化妆品常用的原料之一，功效主要
是减少由面部表情肌收缩造成的皱纹，对额头或眼睛周围的皱纹有理
想的祛除效果。另外，它还能促进胶原蛋白的生成，有助于肌肤组织
重建。阿基瑞林是一种更安全、更廉价、温和的肉毒杆菌毒素替代品。
阿基瑞林作为一种新兴的药妆品原料，高昂的价格限制了其广泛
应用。本研究在前期工作的基础上，对阿基瑞林的合成方法进行了优
化，以期提高阿基瑞林粗肽的纯度，利于后期纯化，为工业化量产提
供参考。
1仪器与试剂
1.1仪器AR224CN分析天平，美国奥豪斯仪器上海有限公司;制
氮机，苏州华德气体设备有限公司;TDL-40B高速大容量离心机，上海
安亭科学仪器厂;SHZ-Ⅳ循环水多用真空泵，南京科尔仪器设备有限
公司;HealForce系列纯水机，香港力康公司;Agilent1200液相，美国
Agilent公司;Agilent1200系列高效液相-ESI质谱联用仪，美国Agilent
公司。
1.2主要材料Rink-Amide树脂，上海吉尔生化有限公司;1，2-二
1
羟基苯并三氮唑(HOBT)、氨基酸原料，成都诚诺新技术有限公司;N-二
异丙基碳二亚胺(DIC)，苏州昊帆高新技术有限公司;N，N-二甲基甲酰
胺(DMF)，天津星马克科技发展有限公司;三氟乙酸(TFA)，上海达瑞精
细化学品有限公司;苯甲醚，天津福晨化工厂;甲基苯基醚、1,2-乙二
硫醇(EDT)，阿拉丁试;无水吡啶、六氢吡啶、冰乙醚、乙腈、冰醋
酸、甲醇，天津科密欧化学试剂有限公司;高纯水，实验室自制。
2方法与结果
2.1投料比的选择取RinkAmide树脂溶胀，脱除Fmoc保护基。
HOBT:DIC:氨基酸(N:N:N)为1.2:1.2:1，树脂:氨基酸按照表1的投
料比(N:N)反应，依次从N端到C端循环偶联氨基酸，合成完毕后，
肽树脂真空减压干燥，称重。结果见表1:树脂:氨基酸投料比为1:3
和1:4时，肽树脂增重差别不大，基于成本考虑，选择投料比为1:3。
2.2裂解液体系的选择取1g肽树脂缓缓加入表2的裂解液体系
中，室温(25℃)裂解2h。过滤裂解液，滤液中缓慢滴加60ml冰乙醚，
3200rpm离心10min，弃去上清液，重复4次，得到粗肽样品并干燥，
检测粗肽纯度。结果显示，TFA:EDT:苯甲硫醚:苯甲醚=90:3:5:2为阿
基瑞林适宜的裂解液体系。
2.3裂解时间的选择取1g肽树脂缓缓加入到裂解液中，室温
(25℃)按照表3中的时间裂解。过滤裂解液，滤液中缓慢滴加60ml冰
2
乙醚，3200rpm离心10min，弃去上清液，重复4次;得到粗肽样品，
干燥并检测粗肽纯度。结果显示，最佳时间为2.0h，时间缩短和延长
粗肽纯度都有降低的趋势。
2.4肽树脂与裂解液比例的选择取1g肽树脂按照表4的比例
(M:V)加入裂解液，室温(25℃)裂解2.0h。过滤裂解液，滤液中缓慢
滴加60ml冰乙醚，3200rpm离心10min，弃去上清液，重复4次;得
到粗肽样品，干燥并检测粗肽纯度。结果显示，最佳比例为1:12。
3讨论
本研究通过单因素优化实验，确定了阿基瑞林合成最佳条件为树
脂:氨基酸投料比为1:3，裂解液体系为TFA:EDT:苯甲硫醚: