酒石酸长春瑞滨的细菌内毒素检查方法
验证探究
酒石酸长春瑞滨(vinorelbinetartrate)化学名3rsquo;，4rsquo;-二
去氢-4rsquo;-去氧-8rsquo;-去甲长春碱二酒石酸盐，属于长春碱
类抑制细胞分裂的抗肿瘤药物，主要通过抑制微管蛋白的聚合，使细
胞分裂停止于有丝分裂中期，是一细胞周期特异性的药物。临床上主
要与其他抗癌药物联合应用于治疗非小细胞肺癌，也可用于晚期乳腺
癌、食管癌等。FDA于1994年批准酒石酸长春瑞滨用于晚期非小细
胞肺癌患者的一线治疗。无菌检查、细菌内毒素检查、微生物限度检
查是药品安全性检查的重要项目。
本品制剂为酒石酸长春瑞滨注射液，其国内现行标准为《中国药
典》，明确规定了细菌内毒素检查的项目与标准。酒石酸长春瑞滨目
前国内现行标准为《中国药典》，现标准中未规定细菌内毒素的控
项目与标准。为更好地控剂的细菌内毒素水平，对酒石酸长春瑞
滨原料开展建立细菌内毒素检查标准与方法的研究，参照《中国药典》
(2010年版)二部附录ⅪXM化学药品注射剂安全性检查法应用指导
原则及附录ⅪE细菌内毒素检查法、USP(85)BACTERIALENDOTOXIN
TES、EP(2.1.6.4)BACTERIALENDOTOXINTES以及EP8.0中酒石酸长
1
春瑞滨细菌内毒素标准、USP37-NF32中酒石酸长春瑞滨注射液的细
菌内毒素标准，建立并验证本品种的细菌内毒素检查标准与方法。
1实验材料
1.1仪器
电子分析天平、DHG-9146A型电热恒温鼓风干燥箱、XW-80A旋
涡混合器、DK-600电热恒温水槽、HH-2F净化工作台。
1.2试剂
1.2.1细菌内毒素工作标准品规格160EU/支，批号150601-
201174，中国药品生物制品检定所。
1.2.2鲎试剂鲎试剂1(lambda;=0.03EU/mL，规格0.1mL/支，批
号1211022，湛江安度斯生物有限公司);鲎试剂
2(lambda;=0.03EU/mL，规格0.1mL/支，批号福州新北
生化工业有限公司)。
1.2.3细菌内毒素检查用水WBET规格50mL/瓶，批号
褔州新北生化工业有限公司。
1.2.4碱性pH调节剂规格2mL/支，批号121127，褔州
新北生化工业有限公司。
1.2.5酒石酸长春瑞滨批号：130701、130702、130901。
2方法(凝胶法)
2
2.1试验准备
试验过程所用的移液枪等仪器设备必须经过确认并在有效期内;
玻璃、不锈钢等容器及用具经250℃，至少1h干热灭菌以去除外源
性内毒素;塑料器具须经清洗并确证不干扰试验结果;所用的标准品、
试剂均在有效期内，鲎试剂初次使用前须进行灵敏度复核。
2.2细菌内毒素限值L
酒石酸长春瑞滨注射液的细菌内毒素标准CP2010、USP37-NF32
中分别为按长春瑞滨计，Llt;6.0EU/mg(CP2010)与Llt;
3.0IU/mg(USP37-NF32);EP8.0中酒石酸长春瑞滨的细菌内毒素标准为
Llt;2.0IU/mg(以长春瑞滨计)。综上所述，本次验证取Llt;1.0IU/mg(以
长春瑞滨计)。
2.3鲎试剂灵敏度复核
按《中国药典》(2010年版)二部附录ⅪE细菌内毒素检查法鲎
试剂灵敏度复核试验项下规定进行，所用2批鲎试剂的实测灵敏度
lambda;c与标示灵敏度lambda;均一致(0.5lambda;