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文件名称:动物细胞培养的基本概念02课件.pptx
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更新时间:2025-06-12
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文档摘要

动物细胞培养的基本概念;目录;1.动物细胞的特点;红血球;动物细胞与微生物细胞的比较

(1)细胞大,无细胞壁;

(2)倍增时间长,生长缓慢,易受污染;

(3)需氧量少,对机械搅拌或剪切力敏感;

(4)以聚集体形式存在;

(5)原代细胞一般繁殖50代左右就退化死亡。

动物细胞与植物细胞比较

共同点:动植物细胞中都有细胞膜、细胞质和细胞核。

区别:动物细胞中无细胞壁、叶绿体和液泡,但是有的植物细胞中无叶绿体。;2.动物细胞与组织培养的定义与分类;1、定义

动物细胞与组织培养(animalcellandtissueculture)是从动物体内取出细胞或组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。

2、分类

动物细胞与组织培养可分为细胞培养、组织培养和器官培养。;细胞培养(cellculture):细胞培养是指细胞的体外培养,这是在无菌条件下,将机体内的组织取出,分散(机械或酶消化)成单个细胞,在模拟体内的环境中,给以营养物质,使细胞不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、分裂、接触抑制以及衰老、死亡等生命现象。细胞培养也包括单个细胞的培养。;组织培养(tissueculture):组织培养是指组织在体外条件下的维持或生长。此种方法可有组织分化及保特组织的结构和/或功能的特点。这里需要说明的是,当我们做组织培养时,不论用什么方法和条件,组织培养中的主要成分仍然是细胞;细胞在生长过程中总有移动(运动)和其他变化,这样就使得被培养的组织难以长期维持其原有的结构和功能。培养时间越长,发生变动的可能性越大。结果常使单一类型的细胞易保存下来,最终也成了细胞培养。

所谓细胞培养,并不意味着细胞彼此之间是独立的。细胞在培养中的生命活动和体内细胞一样,仍然是相互依存的,呈现一定组织的特征。所以组织培养和细胞培养并无严格区别,两者在一定程度上可看作是同义语。;3.细胞体外培养可分为原代培养与传代培养

原代培养(primaryculture):是指将机体取出的细胞或组织进行实效培养的过程。实效培养的细胞大约增殖10代左右,这样的细胞称为原代细胞。

传代培养(subculture):从原代培养的细胞继续转接培养的过程。

细胞系(cellline):原代细胞经第一次传代后,形成的细胞群体,即具有增殖能力,类型均匀的培养细胞,一般为有限细胞系。

细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标记的单一类型的细胞群体。

体外动物细胞在形态结构上均程度不同的与原来的细胞有所差异。;;细胞系与细胞株

(1)细胞系的建立

原代培养的培养物中所含的细胞类型多而复杂,培养初期,生长的细胞类型多种多样随培养时间延长:一些细胞退化、死亡;另一些细胞适应环境而生长繁殖培养物逐步变均匀。

传代培养意义:不仅在于维持细胞不断地生长,而且使培养物逐步演变为具有增殖能力、特征专一、类型均匀的培养细胞,即细胞系。

细胞系:指从原代培养物经传代培养后得来的一群特征专一、类型均匀的细胞,可以长期连续传代。

限定细胞系(有限细胞系):寿命有限,一般为20~80代。

连续培养细胞系(无限细胞系):细胞发生转化,可连续培养和生长,寿命变为“无限”。

;(2)细胞株(克隆株)

分离单一细胞并使其繁殖形成的细胞群称为细胞株。

单个细胞的生活能力很弱,必须采取特殊的培养措施。

适应和同化过程:在细胞接种到新培养液的初期,细胞既从培养液中摄取营养,也要向培养液排出一定物质,其结果使得培养液更易被吸收和利用。

适应培养液:

制备:选择生长状态良好的对数生长期细胞,无死细胞和碎片,所用细胞的种类应与要克隆的细胞相同。吸出培养液,用G6滤器过滤贮于冰箱中备用。

制备适应性培养基时注意:选用成分齐全的合成培养基,可不加抗生素。;感谢聆听