肿瘤病理切片诊断与分析
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目录
CONTENTS
01
样本采集与预处理
02
切片制备技术
03
染色方法与原理
04
病理诊断标准
05
报告撰写规范
06
质控与技术创新
01
样本采集与预处理
活检标本获取方法
通过细针或粗针穿刺肿瘤组织，获取组织样本进行病理诊断。这种方法常用于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断。
穿刺活检
切割活检
刮片活检
通过手术或内窥镜等方法，直接切割肿瘤组织获取样本。这种方法常用于获取较大的组织块，用于更详细的病理分析。
通过刮取肿瘤表面或组织表面获取细胞样本进行病理诊断。这种方法主要用于细胞学检查，对组织破坏性较小。
福尔马林是常用的组织固定液，具有良好的固定效果和保存性能，可以很好地保存组织细胞的形态和抗原性。
样本固定液选择标准
福尔马林
醋酸可以用于固定细胞，尤其是用于细胞学检查，能够使细胞膨胀，便于观察和分析。
醋酸
乙醇也是一种常用的固定液，可以快速固定组织，但需要脱水处理，容易引起组织收缩和变形。
乙醇
运输与保存条件控制
温度控制
样本在运输和保存过程中需要保持适当的温度，一般要求在4℃左右，以避免细胞变性和组织自溶。
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避光保存
样本需要避免阳光直射或长时间暴露在强光下，以免光线破坏细胞和组织结构。
02
防潮防尘
样本在运输和保存过程中需要保持干燥，避免受潮和污染，以免影响病理诊断结果。
03
02
切片制备技术
石蜡包埋操作流程
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通过递增浓度的乙醇将组织中的水分完全脱去。
组织脱水
将透明后的组织放入熔化的石蜡中，完全浸透。
浸蜡
将脱水后的组织放入透明剂中，使石蜡能够顺利渗透。
透明
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将浸蜡后的组织放入模具中，冷却后形成蜡块。
包埋
04
切片厚度与平整度要求
通常为4-6微米，过厚或过薄都会影响染色和观察。
切片厚度
要求切片平整、无皱褶，保证染色均匀。
切片平整度
应与组织的长轴平行，以获得完整的细胞形态。
切片方向
组织脱蜡与复水步骤
脱蜡
梯度复水
洗涤
染色前处理
将切片放入二甲苯中，使石蜡完全溶解。
依次放入不同浓度的乙醇中，最后放入蒸馏水中，使组织逐渐复水。
用蒸馏水或PBS洗涤，去除残留的化学试剂。
根据染色方法的不同，可能需要进行特定的前处理，如抗原修复、酶消化等。
03
染色方法与原理
HE染色标准流程
样本处理
将组织样本切成薄片，经过固定、脱水、透明等步骤处理。
01
染色过程
使用苏木素染液染色，再用伊红染液复染，使细胞核呈蓝色，细胞质呈红色。
02
分化与脱色
通过分化液去除多余的染料，使组织切片更加清晰。
03
封固与观察
使用中性树胶封固切片，并在显微镜下观察组织结构和细胞形态。
04
免疫组化染色技术要点
抗原修复
显色反应
抗体孵育
结果判读
采用高温高压或酶消化的方法，使组织抗原得到修复和暴露。
选择合适的抗体，与组织切片上的特定抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
通过酶标二抗和底物反应，使抗体结合部位呈现颜色。
根据染色强度和分布，判断目标抗原在组织中的表达情况。
如苏丹Ⅲ染色，用于检测组织中的脂质成分。
脂质染色
如Masson染色，用于区分胶原纤维和肌纤维。
纤维组织染色
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04
如PAS染色，用于检测组织中的糖原和黏液物质。
糖类染色
如抗酸染色，用于检测结核分枝杆菌等抗酸性微生物。
微生物染色
特殊染色应用场景
04
病理诊断标准
细胞异型性评估指标
细胞核形态
细胞质特征
细胞排列结构
细胞间质变化
恶性肿瘤细胞核形态不规则，核分裂象增多，核染色质增多、深染，核仁明显。
恶性肿瘤细胞质常呈嗜碱性，染色深，有时可见细胞质内有空泡或颗粒状物质。
恶性肿瘤细胞排列紊乱，失去正常组织结构和极性。
恶性肿瘤细胞间质通常较少，且结缔组织常发生增生、变性或坏死。
良性肿瘤生长缓慢，呈膨胀性生长或外生性生长；恶性肿瘤生长迅速，呈浸润性或外生性生长。
良性肿瘤边界清晰，常有包膜包裹；恶性肿瘤边界模糊，无包膜或包膜不完整。
良性肿瘤不转移；恶性肿瘤易发生转移，可经淋巴道、血道或种植性转移。
良性肿瘤组织分化程度较高，与正常组织相似；恶性肿瘤组织分化程度低，与正常组织差异大。
良恶性肿瘤鉴别特征
生长方式与速度
边界与包膜
转移情况
组织分化程度
分级与分期判定依据
组织学分级
根据肿瘤细胞的分化程度、异型性、核分裂象数目等对恶性肿瘤进行分级，通常分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级，级别越高恶性程度越高。
临床分期
根据肿瘤的大小、浸润深度、淋巴结转移情况和远处转移情况，对肿瘤进行临床分期，以制定合适的治疗方案和预测预后。
TNM分期系统
根据肿瘤的大小（T）、淋巴结转移情况（N）和远处转移情况（M），将肿瘤分为不同的临床分期，是临床常用的肿瘤分期方法。
病理分期
基于组织病理学检查，对肿