;真实的工作任务;岗位工作任务;类型;组织和细胞刚刚离体,生物学特性未发生很大变化,仍具有二倍体遗传性,最接近和反映体内生长特性,是药物测试、细胞分化等实验的很好对象;原代细胞培养也是建立各种细胞系(cellline)或细胞株(cellstrain)必须经过的阶段。
原代细胞培养多由各种细胞成分组成,比较复杂,即使是经过处理后的细胞,也仍具有异质性(heterogeneous),主要表现在细胞形态和大小不一。;动物细胞的生理特点;动物细胞对周围环境十分敏感
对理化因素敏感:如渗透压、pH、离子强度、剪切力、微量元素等。
由细胞膜结构决定。
细胞的分裂周期长:一般12-48h大肠杆菌:20min酵母:2h
;动物细胞的生理特点;细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制现象:
除少数细胞可悬浮培养外,大多数正常二倍体细胞的生长都需要在一定的基质(玻璃、塑料等)上贴附,伸展后才能生长增殖。
接触抑制:当细胞在基质上分裂增殖,逐渐汇合成片时,即每个细胞与其周围细胞相互接触时,细胞就停止增殖。此时若保持充足的营养,细胞仍可存活一段时间,但细胞密度不再增加……;贴壁细胞;悬浮细胞;兼性贴壁细胞;游离期
贴壁期
潜伏期
对数生长期
停止期(平台期);细胞接种后在培养液中呈悬浮状态,也称悬浮期
细胞质回缩,胞质呈圆球形
10分钟-4小时;细胞附着于底物上,游离期结束。
底物:胶原、玻璃、塑料等
细胞株平均在10分钟-4小时贴壁
血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋白。
进口塑料培养瓶涂有生长基质(化学合成的功能基团);潜伏期:
细胞有生长活动,而无细胞分裂,细胞株潜伏期一般为6-24小时。
对数生长期:
细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳,最适合进行实验研究。
停止期:
细胞长满瓶壁,虽有活力但不再分裂,机制为接触抑制、密度依赖性。;敬请各位专家批评指正!