高灵敏度、高选择性；对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；d.荧光检测器*第28页，共71页，星期日，2025年，2月5日ELSD是基于溶质的光散射性质的检测器。由雾化器、加热漂移管（溶剂蒸发室）、激光光源和光检测器（光电转换器）等部件构成。e.蒸发光散射检测器第29页，共71页，星期日，2025年，2月5日*第三章高效液相色谱分析法第二节主要分离类型与原理第30页，共71页，星期日，2025年，2月5日*一、液-固吸附色谱固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5～10μm的硅胶吸附剂；流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。基本原理：组分在固定相吸附剂上有吸附作用，且吸附力有差异，经过多次吸附与解吸而被分离；适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性；缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；第31页，共71页，星期日，2025年，2月5日机制：溶质分子(X)和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S），可表示如下：式中：Xm--流动相中的溶质分子；Sa--固定相中的溶剂分子；Xa--固定相中的溶质分子；Sm--流动相中的溶剂分子。当吸附竞争反应达平衡时：式中：K为吸附平衡常数，亦即分配系数。一、液-固吸附色谱*第32页，共71页，星期日，2025年，2月5日二、液-液分配色谱固定相与流动相均为液体（互不相溶）；基本原理：组分在固定相和流动相中的溶解度不同；a.正相液—液分配色谱法:流动相的极性小于固定液的极性。b.反相液—液分配色谱法:流动相的极性大于固定液的极性。第33页，共71页，星期日，2025年，2月5日c.液—液分配色谱法的缺点：固定液在流动相中仍有微量溶解；流动相通过色谱柱时的机械冲击力，会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相，可克服上述缺点。化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）。二、液-液分配色谱*第34页，共71页，星期日，2025年，2月5日三、离子对色谱原理：将一种（或多种）与溶质离子电荷相反的离子（对离子或反离子）加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物，使其能够在两相之间进行分配；其原理可用下式表示：X+水相+Y-水相===X+Y-有机相式中：X+水相——流动相中待分离的有机离子）；Y-水相——流动相中带相反电荷的对离子；X+Y-——形成的粒子对化合物。当达平衡时：KXY=[X+Y-]有机相/[X+]水相[Y-]水相分配系数为：DX=[X+Y-]有机相/[X+]水相=KXY[Y-]水相离子对色谱法(特别是反相)发解决了以往难以分离的混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。第35页，共71页，星期日，2025年，2月5日*阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子；阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子；反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C-18柱)，含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-后；在两相间分配。三、离子对色谱第36页，共71页，星期日，2025年，2月5日*四、离子交换色谱固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂；流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子交换：R—SO3H+M+=R—SO3M+H+阴离子交换：R—NR4OH+X-=R—NR4X+OH-第37页，共71页，星期日，2025年，2月5日*分离原理：由于静电场相互作用，样品阴离子以及淋洗剂阴离子（也称淋洗离子）都与固定相中带正电荷的交换基团作用，样品离子不断地进入固定相，又不断地被淋洗离子交换而进入流动相，在两相中达到动态平衡。四、离子交换色谱第38页，共71页，星期日，2025年，2月5日以阴离子交换剂为例，其交换过程可表示如下：X-(溶剂中)+(树脂-R4N+Cl-)=(树脂-R4N+X-)+Cl-(溶剂中)当交换达平衡时：KX=