第1页，共22页，星期日，2025年，2月5日二、标记方法1．肥料标记：（核农学P-320）⑴合成法：①把32P结合到其中一种成分中去。如可在制备过磷酸钙时，在硫酸中加入32P标记的磷酸盐，用这种硫酸处理磷矿粉，制得的过磷酸钙，除有正常结构外，还有分布均匀的32P示踪原子。32P-磷酸盐+硫酸→处理磷酸粉→32P-标记过磷酸钙②实验室内用32P-H3PO4制备标记磷酸铵H332PO4+NH3=NH4H232PO4或H332PO4+2NH3=(NH4)2H32PO4⑵交换法：最常用的标记方法。用32P标记的磷酸盐溶液与普通过磷酸钙肥料混合，搅成糊状，保持若干小时，在此过程中不断搅拌，甚至可以加温至70℃左右，以促进肥料中的31P与加入的32P进行同位素交换，直到达到相对平衡，然后烘干，磨细备用。第2页，共22页，星期日，2025年，2月5日⑶中子活化法：标记难容性矿粉时，用同位素交换法，其速度极为缓慢。可直接把磷矿粉放入原子反应堆中，用中子轰击磷矿粉的方法（中子通量一般不低于1012~13n/cm2·sec），使磷矿粉中的31P获得中子后变为32P（31P+δn—→32P+r）。这种比较方法可使磷矿粉中的其它元素同时被标记，在使用前需将短半衰期的放射性核素进行冷却衰变，在操作及样本测量时，也需要注意其它被活化的放射性核素，如45Ca、46Sc、60Co等放射性的防护和叠加干扰。冷却(Cooling)：通过放射性衰变来减弱强放材料的放射性活度的方法。第3页，共22页，星期日，2025年，2月5日2．土壤标记：将32P标记液注射或喷洒到土壤中，或与土壤均匀混合。可用于测定肥料利用率、磁带土壤有效养分、研究土壤中根条活力、根际磷吸收、耗竭等。3．植物标记：⑴根部引入，用土培、水培或砂培等。⑵地上部分引入：叶面喷涂、茎根注射。主要用于研究植物对磷的吸收、运转和代谢等。4．离体标记：研究磷的运转、代谢等。5．其他：微生物标记通过培养介质标记，单细胞藻类也可通过培养介质标记。如将32P-K2HPO4加到培养钝顶螺旋藻的培养液中，可得到32P-钝顶螺旋藻体，进而可用标记的藻体用作鱼饵料的研究和珍珠蚌摄食的研究。（核农学通报：1987，2：7－8）第4页，共22页，星期日，2025年，2月5日§6-232P样品的制备和测量一、活体样和鲜样：可以把活体测量看作是测量固体样品的特殊方式。例如，在研究32P标记的肥料自土壤进入植物体的速度时，即要进行活体测量。可用钟罩型计数管进行植物活体测量。活体测量虽然简单易行，但误差很大，一般只能粗略的定性测定。新鲜样品的策略是把新鲜样品采回，稍许加工，不进行灰化。或烘干即进行测量。主要有“打孔法”和“匀浆法”。（见农学中同位素示踪技术P-122）。上述鲜样组织的测样，虽然手续简便、迅速，但误差很大。一般仅能判断同位素在各组织器官中大致的放射性活度。第5页，共22页，星期日，2025年，2月5日二、干样：粉样：50~100mg/皿，无限薄、均匀。三、湿灰化：1．HClO4－H2O2法，慢灰化、起泡法。2．H2SO4－H2O2法，消煮葛才林等。小麦干粉0.5g，加Na2H32PO4，加3mlHClO4和3mlH2O2，加热起爆至无色，碱液稀释到10ml，闪烁测量。四、干灰化：500~550℃马福炉中灰化4~5h，至灰白色，用2NHNO3溶解，蒸发至半干，过滤定容。测量方法：定标器、契伦可夫、液体闪烁测量等。第6页，共22页，星期日，2025年，2月5日§6-3植物对磷的吸收利用和代谢研究一、植物体内32P代谢组分的提取和分离：见实验资料。陈子元主编，核技术及其农业科学中的应用，P518~519。二、磷的吸收、运转研究：1．磷的吸收、运转和小麦生长发育的关系王志芬等，核农学通报，93，14（4）：171~179。2．磷在棉株中的吸收、运转和分布规律许萱等。3．磷素代谢研究离体小麦根和叶中32P的转化。（P520~521陈子元，核技术及及其农业科学中的应用）第7页，共22页，星期日，2025年，2月5日§6-4磷肥利用的研究一、原理：1．利用标记磷肥：根据同位素稀释原理：Pf×Sf=PT×SP=Pf/PT=SP/SfPf：植物中吸收自肥料的磷含量；PT：植物体内的总磷；SP：植物中比活度；Sf：肥料中比活度。Pf/PT为植物吸收的肥料磷占植物中总磷的比值，简称Pdff，则吸自土壤P的比值为1-Pdff。磷肥利用率（%）=植物吸收肥料P2O5（mg）/应用的肥料P2O5（mg）×100=（Pdff×PT/应用的肥料P2O5）