第39讲无菌操作技术实践第十一单元生物技术实践

[考纲要求]1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。

考点一微生物的分离和培养考点二分离特定的微生物并测定其数量矫正易错强记长句重温高考演练模拟内容索引课时作业

微生物的分离和培养考点一

1.相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在内，在℃下加热h以达到灭菌的目的。②湿热灭菌法常采用进行，其使用包括加水、、、、出锅等步骤。知识梳理干热灭菌箱1～2160～170高压蒸汽灭菌锅装锅加热排气保温保压

(2)培养基的配制①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物________________的营养基质。②营养组成：一般都含有、(提供碳元素的物质)、(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入等特殊的营养物质，并要调节培养基中使之满足微生物生长的需要。③种类：培养基和培养基，前者的主要优点是______________________，缺点是营养成分；后者的优点是，缺点是。生长、繁殖或积累水代谢产物碳源氮源pH天然维生素合成取材便利、营养丰富、配制简便难以控制、实验结果的重复性较差化学成分及其含量明确，实验的可重复性好配制繁琐、成本较高

(3)微生物的接种①接种：是指在条件下将微生物接入的操作过程。②常用的工具有等，在涂布平板接种时要用，穿刺接种时要用接种针，在或在固体培养基平板上进行时要用接种环。无菌玻璃涂布器、接种针、接种环培养基玻璃涂布器斜面接种划线接种

2.大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的：、和等。②主要步骤：准备接种→→→挑取少许菌种→→在中培养大肠杆菌24h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4℃)保存。菌种转移保存纯净菌种扩大培养接种环灭菌试管口灭菌划线接种37℃恒温箱

(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板制作的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。b.甲、乙、丙中的灭菌方法是。c.丁中的操作需要等待后才能进行。②平板划线法是指用带有微生物的在平板培养基表面通过__________而纯化分离微生物的一种方法。丙→乙→甲→丁平板冷却凝固灼烧灭菌接种环分区划线

消毒和灭菌易混辨析项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干