基本信息
文件名称:检测技术及梅毒实验室检测技术 (2).ppt
文件大小:8.02 MB
总页数:40 页
更新时间:2025-06-16
总字数:约4.4千字
文档摘要

非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义早期梅毒(一期、二期)经足量规则抗梅毒治疗后一期梅毒1年后转为阴性二期梅毒2年后转为阴性。晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢,2年后约50%病人血清反应仍为阳性。非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。因治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。第30页,共40页,星期日,2025年,2月5日非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点假阳性反应技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳性反应,经过重复试验即可排除。生物学假阳性反应(一般滴度小1:8),应采用梅毒螺旋体抗原血清学试验如TPPA等进行排除。第31页,共40页,星期日,2025年,2月5日梅毒螺旋体抗原血清学试验原理抗原为梅毒螺旋体特异蛋白(包括螺旋体重组特异抗原),检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体。感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性,则患者终身阳性。第32页,共40页,星期日,2025年,2月5日第1页,共40页,星期日,2025年,2月5日窗口期HIV感染后的血清学动态Anti-P24HIVRNA感染1周2周3周4周………………1年2年3年………..10年………..急性期潜伏期Anti-gp41/120(anti-gp36)Ag艾滋病期Ab浓度第2页,共40页,星期日,2025年,2月5日试验室假阴性报告的原因分析窗口期非典型血清学转换病毒变异实验室误差实验室进行艾滋病抗体筛查很很多的原因可能造成漏检,曾经有文献具体分析过造成漏检的原因,主要原因有因为窗口期的原因造成漏检,因为病毒变异以及实验室误差等原因造成的漏检.其中最主要的原因是因为窗口期的问题造成的漏检.占整体比例的93.7%.第3页,共40页,星期日,2025年,2月5日筛查试验复核检测确证试验检测程序及流程图第4页,共40页,星期日,2025年,2月5日HIV抗体筛查检测流程样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验原有试剂+另一不同原理(或厂家)试剂或另外两种不同原理(或厂家)试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性第5页,共40页,星期日,2025年,2月5日酶联免疫吸附试验(ELISA)化学发光法快速检测及其它检测明胶颗粒凝集试验(PA)免疫渗滤试验:斑点ELISA和斑点免疫胶体金(或胶体硒)快速试验电化学发光试验其它快速筛查试验方法艾滋病唾液尿液检测试剂初筛检测方法第6页,共40页,星期日,2025年,2月5日酶联免疫试验(ELISA)最早用于检测血清中HIV抗体的有效筛检方法;很高的敏感性和特异性;HIV抗体检测试剂根据其抗原的来源和检测方式可分为四代;根据检测方法,可分成四类间接法、双抗原夹心法、竞争法和捕获法。第7页,共40页,星期日,2025年,2月5日(1)胶体金(胶体硒)法(2)明胶凝集法(3)斑点印迹试验(4)电化学发光法快速检测方法第8页,共40页,星期日,2025年,2月5日(1)胶体金法原理:采用双抗原夹心法免疫测定原理,使用纯化HIV-1/2基因重组抗原,分别固定于硝酸纤维膜上,作为检测线,并且用这些抗原标记胶体金。当待检样本中存在HIV抗体时,先和金标记抗原结合,由于层析作用向前移动,当遇到膜上固定的抗原时,形成Ag-Ab-Ag-AU复合物而富集在包被线上,形成一条或二条红色线,是阳性结果。反之,若标本中不存在HIV抗体,则不会出现红线,是阴性结果。无论样本中是否含有HIV抗体,在质控线区域都会形成另一条红色线。T-检测线C-质控线第9页,共40页,星期日,2025年,2月5日1.准备试剂与相关耗材2.每个样本检测用一片试剂,标上相应样本编号.3.加入50μl全血或血清和血浆4.5-20分钟读取结果5.读取和记录检测结果.第10页,共40页,星期日,2025年,2月5日阳性反应:在质控窗和反应窗均显示红线。阴性反应:只在质控窗出现红线,反应窗没有红线。无效:在质控窗没有出现红线,说明检测无效,需要重新检测。第11页,共40页,星期日,2025年,2月5日第四代试剂

联合检测HIVP24抗原和抗HIV抗体电化学发光法第12页,共40页,星期日,2025年,2月5日第一代艾滋病抗体检测试剂检测的是HIV-1的IgG抗体,检测的窗口期大约是42天.第二代试剂可以检