项目1胡萝卜离体根培养主讲人：郭建东
任菌操作培养基配制植物组织培养准备组织培养
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分无机盐(大量元素、微量元素)有机化合物(蔗糖、维生素类、氨基酸、核酸及其他水解化合物)铁盐螯合剂植物激素
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（1）大量元素：指浓度大于0.5mmol／L的元素等N：称为生命元素，是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在制备培养基时以NO3—N和NH4—N两种形式供应。P：是磷脂的主要成分。常用的物质有KH2P04或NaH2P04K：对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。制备培养基时，常以KCl、KN03等盐类提供。提供。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（1）大量元素Mg、S和CaMg是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂；S是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。它们常以MgSO4·7H20提供。Ca是构成细胞壁的一种成分，Ca对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用，常以CaCl2·2H2O提供。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（2）微量元素：小于0.5mmol／L的元素主要有Fe，B，Mn，Cu，Mo，Co等。铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时，它又是叶绿素形成的必要条件。培养基中的铁对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用。在制做培养基时不用Fe2SO4和FeCl3(因其在pH值5．2以上，易形成Fe(OH)3的不溶性沉淀)，而用FeSO4·7H20和Na2—EDTA结合成合物使用。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（3）有机化合物碳水化合物：最常用的碳源是蔗糖，以3%最常用。高压灭菌时，一部分蔗糖会发生分解，制定配方时要给予考虑。葡萄糖和果糖也是较好的碳源，可支持许多组织很好的生长。在大规模生产时，可用食用的绵白糖代替。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成蔗糖（0%）外植体完全被绿色的芽所包裹，根生长在其下表面在外植体上既没有芽发生，也没有根和愈伤组织产生外植体上表面边缘产生芽，也有一些根发生芽从外植体的上表面发生而根从下表面发生非洲紫罗兰组织培养情况蔗糖（3%）蔗糖（1%）蔗糖（5%）
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（3）有机化合物维生素：主要以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长、分化等有很好的促进作用。常用的有VBl(盐酸硫胺素)、VB6(盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、Vc（抗坏血酸）、有时还使用生物素、叶酸、VB12等。一般用量为0.1~1.0mg／L。VB1对愈伤组织的产生和生活力有重要作用，VB6能促进根的生长，Vpp与植物代谢和胚的发育有一定关系。Vc有有防止组织褐变的作用。防止组织变褐的作用。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（3）有机化合物肌醇：又叫环己六醇，在糖类的相互转化中起重要作用。使用浓度一般为l00mg／L，适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。
任务二、培养基配制一、培养基种类及组成2.培养基成分（3）有机化合物氨基酸：是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。天然复合物：椰乳、香蕉泥、马铃薯汁、酵母提取液
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