项目1胡萝卜离体根培养主讲人:郭建东
任菌操作培养基配制植物组织培养准备组织培养
任务二、培养基配制二、母液的配制1.母液配制目的方便配制其他培养基;保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取
任务二、培养基配制二、母液的配制2.母液配制方法(1)单配法:将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓度的母液。一般用a:b表示,即每b毫升溶液中含有a毫克溶质。(2)混配法:将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍数称量,分别溶解后每一类混合在一起定容到一定体积配成混合母液。浓度可用amg/L表示,即配制一升培养基吸取该母液aml。
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制有机物母液铁盐母液无机大量母液无机微量母液激素母液以MS培养基为例
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制配制MS培养基时母液的计算
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制药品去离子水称量溶解定容置于试剂瓶、贴标签保存配制流程图
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制(1)无机大量母液(扩大10倍配1L)成分硝酸钾
硝酸铵硫酸镁
磷酸二氢钾氯化钙称量工具托盘天平注意:无机大量母液中的各种物质在混合过程中有些离子易产生沉淀,应使每种物质先充分溶解,再进行混合,而且钙盐最后缓慢加入进去。
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制硼酸,硫酸铜,硫酸锰,硫酸锌,氯化钴,钼酸钠,碘化钾托盘天平和电子天平(2)无机微量母液(扩大100倍配1000ml)称量工具成分
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制(3)铁盐(扩大100倍1000ml)铁盐硫酸亚铁,Na2-EDTA注意:铁盐采用托盘天平称取。铁盐选用硫酸亚铁而不用硫酸铁,是因为它溶解后易产生红色的氢氧化铁沉淀。
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制(4)有机物(扩大50倍500ml)有机物甘氨酸VB1VB6烟酸肌醇注意:有机物中的物质均采用托盘天平和电子天平称取。
任务二、培养基配制二、母液的配制3.母液配制(5)激素母液(常用的)生长素NAA,IBA,2,4-D,IAA细胞分裂素6-BA,KT,GA,ZT注意:一般配成1mg/ml,NAA、IBA、IAA一般可先用少量95%酒精助溶。2,4-D可用0.1mol/L的NaOH或KOH助溶,细胞分裂素类一般先用少量1mol/L盐酸溶解。
任务二、培养基配制二、母液的配制4.母液保存(1)装瓶:将配制好的母液分别倒入瓶中,贴好标签,在标签上注明母液名称,配制倍数,与配制日期。(2)储藏:母液配好后放人冰箱内4℃低温保存,用时再按比例稀释。
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