（二）连续培养1、连续培养方法的优缺点2、连续培养法的分类第62页，共110页，星期日，2025年，2月5日细菌连续培养的设备简化示图
第63页，共110页，星期日，2025年，2月5日1、连续培养方法的优点（1）细胞生长速率较高。（2）连续培养可发使得培养液达到一个稳定状态2、连续培养方法的缺点（1）连续培养延续的时间长，发生杂菌污染的概率也就增加（2）长时期进行连续培养，细胞发生变异、质粒丢失、基因突变（3）细菌株生产性能退化的现象也就比较突出第64页，共110页，星期日，2025年，2月5日3、连续培养法的分类可以分为以下3类：（1）单级连续培养（2）细胞回流式的单级连续培养（3）多级连续培养第65页，共110页，星期日，2025年，2月5日（1）单级连续培养新鲜培养基的加入速率=培养之后的物料抽出速率。这种培养方法称为单级连续培养法。在单级连续培养方法之中，发酵液体积保持恒定，生物反应器中各组分分布均匀。单级连续培养是一种最简单的连续培养方法。第66页，共110页，星期日，2025年，2月5日（2）细胞回流式的单级连续培养将单级连续培养流出液中的细胞加以浓缩，然后再送回到生物反应器中，这种方法称为细胞回流式的单级连续培养。细胞回流式的单级连续培养相当于不断地对生物反应器进行接种，有利于提高连续培养的效率。第67页，共110页，星期日，2025年，2月5日（3）多级连续培养将几个生物反应器串联起来，第一个反应器的流出液作为第二个反应器的流入液，第二个反应器的流出液又作为第三个反应器的流入液，这种培养方式就称为多级连续培养法。第68页，共110页，星期日，2025年，2月5日（三）其它培养方法1、补料分批培养2、透析培养3、萃取培养4、闪蒸培养5、离子交换培养第69页，共110页，星期日，2025年，2月5日1、补料分批培养补料分批培养法是介于分批培养和连续培养之间的一种操作方法。是指在进行分批培养中间，向生物反应器中加入营养物质进行补料，但同时不取出培养液的方法。
（1）方法改良（2）补料分批培养的优点（3）补料分批培养的缺点由于补料，使得培养液的体积逐渐扩大，到一定时间之后，再将培养液从反应器中一次性放出第70页，共110页，星期日，2025年，2月5日（1）方法改良连续补料分批培养法——在进行补料分批培养时，如果所取出的培养液数量少于补进的物料数量，反复进行多次的放料和补料操作，这种方法称为连续补料分批培养。第71页，共110页，星期日，2025年，2月5日（2）补料分批培养的优点
（1）通过流加高浓度的营养物质，培养罐内的细胞浓度可以达到非常高的程度这对于细胞产物的生产十分有利（3）通过补料，能够解除某些营养物的低浓度限制效应提高产物的合成效率。（2）通过补料和放料的连续进行，能够解除某些基质、产物对细胞的抑制作用第72页，共110页，星期日，2025年，2月5日（3）补料分批培养的缺点（1）要考虑到生物反应器的供氧能力（2）要考虑培养过程中大量代谢产物积累后的细胞毒性第73页，共110页，星期日，2025年，2月5日第四节发酵设备及消毒灭菌第74页，共110页，星期日，2025年，2月5日发酵的一般流程种子扩大培养培养基配制空气除菌培养基灭菌发酵生产下游处理发酵设备第75页，共110页，星期日，2025年，2月5日发酵设备——发酵罐发酵罐的特点轴封严密，泄漏少能承受一定压力、温度搅拌通风装置保证气液充分混合具有足够的冷却面积死角少，灭菌彻底适宜的径高比（高与直径的比值为2.5—4）第76页，共110页，星期日，2025年，2月5日发酵罐的类型搅拌釜反应器鼓泡式反应器气升式反应器发酵设备——发酵罐第77页，共110页，星期日，2025年，2月5日发酵辅助设备无菌空气系统灭菌系统、管道、阀门第78页，共110页，星期日，2025年，2月5日放线菌之诺卡氏菌属(Norcadia)生产利福霉素等。第30页，共110页，星期日，2025年，2月5日放线菌之小单胞菌属(Micromonospora)多种可产抗生素，如棘孢小单胞菌(M.echinospora)产庆大霉素。第31页，共110页，星期日，2025年，2月5日真菌之根霉属(Rhizopus)生产甾体激素、延胡索酸及酶制剂等。第32页，共110页，星期日，2025年，2月5日真菌之曲霉属(Aspergillus)生产枸橼酸、葡萄糖酸、有机酸类、抗生素，进行甾体转化。第3