pcr上岗证考试题及答案
一、单项选择题（每题2分，共10题）
1.下列关于PCR引物的说法，正确的是（）
A.引物长度通常为20-30bp
B.引物自身不能有互补序列
C.引物与模板的退火温度一般在65℃左右
D.引物的3’端可以与模板不完全互补
答案：B
解析：引物长度通常为15-30bp，A错误；引物自身不能有互补序列，否则会形成引物二聚体，B正确；引物与模板退火温度根据引物GC含量等因素而定，一般在55-65℃，C不准确；引物3’端必须与模板完全互补，D错误。
2.PCR反应体系中，TaqDNA聚合酶的作用是（）
A.解开双链DNA
B.催化引物的合成
C.延伸DNA链
D.识别模板序列
答案：C
解析：解开双链DNA的是高温，A错误；引物是人工合成的，不是TaqDNA聚合酶催化合成，B错误；TaqDNA聚合酶作用是在引物引导下延伸DNA链，C正确；识别模板序列的是引物，D错误。
3.PCR反应的变性温度一般是（）
A.90-95℃
B.55-65℃
C.72℃
D.37℃
答案：A
解析：90-95℃能使双链DNA变性解链，A正确；55-65℃是退火温度范围，B错误；72℃是延伸温度，C错误；37℃不是PCR反应变性温度，D错误。
4.下列哪种物质不是PCR反应体系所必需的（）
A.dNTP
B.Mg2?
C.限制性内切酶
D.TaqDNA聚合酶
答案：C
解析：dNTP为合成DNA提供原料，A是必需的；Mg2?是TaqDNA聚合酶活性所必需的，B是必需的；限制性内切酶用于切割特定DNA片段，不是PCR反应必需的，C符合；TaqDNA聚合酶催化DNA延伸，D是必需的。
5.PCR技术可用于（）
A.DNA测序
B.蛋白质定量
C.细胞培养
D.细菌的形态鉴定
答案：A
解析：PCR技术可用于扩增特定DNA片段，可用于DNA测序等，A正确；蛋白质定量一般用特定蛋白质定量方法，与PCR无关，B错误；细胞培养不需要PCR技术，C错误；细菌形态鉴定主要通过显微镜观察等方法，不是PCR，D错误。
6.在PCR反应中，引物的设计原则不包括（）
A.特异性
B.长度适宜
C.富含AT
D.避免形成引物二聚体
答案：C
解析：引物要具有特异性，能准确结合模板，A是原则；长度通常15-30bp适宜，B是原则；不应富含AT，而应根据模板情况合理设计GC含量等，C不是原则；要避免形成引物二聚体，D是原则。
7.PCR反应的延伸时间主要取决于（）
A.模板DNA的长度
B.引物的长度
C.TaqDNA聚合酶的活性
D.dNTP的浓度
答案：A
解析：模板DNA越长，延伸所需时间越长，A正确；引物长度主要影响退火温度等，与延伸时间关系不大，B错误；TaqDNA聚合酶活性影响反应速度但不是决定延伸时间的主要因素，C错误；dNTP浓度影响反应原料充足程度，不是延伸时间决定因素，D错误。
8.下列关于PCR产物检测方法，错误的是（）
A.琼脂糖凝胶电泳可检测PCR产物大小
B.荧光定量PCR可进行核酸定量分析
C.测序可确定PCR产物序列
D.蛋白质印迹法可检测PCR产物
答案：D
解析：琼脂糖凝胶电泳能根据条带位置判断PCR产物大小，A正确；荧光定量PCR可通过荧光信号强度进行核酸定量分析，B正确；测序能明确PCR产物具体序列，C正确；蛋白质印迹法用于检测蛋白质，不能检测PCR产物（DNA），D错误。
9.PCR实验室分区中，对环境要求最高的是（）
A.试剂准备区
B.样品处理区
C.扩增区
D.产物分析区
答案：C
解析：扩增区要严格防止外源核酸污染，对环境要求最高，C正确；试剂准备区主要是准备试剂，污染风险相对较小，A错误；样品处理区有一定污染风险，但低于扩增区，B错误；产物分析区主要是对已扩增产物分析，环境要求不是最高，D错误。
10.下列关于PCR技术的发展历程，错误的是（）
A.Mullis发明了PCR技术
B.最初的PCR技术使用大肠杆菌DNA聚合酶
C.TaqDNA聚合酶的发现推动了PCR技术广泛应用
D.实时荧光定量PCR是近年来发展起来的新技术
答案：B
解析：Mullis发明了PCR技术，A正确；最初PCR技术用的是大肠杆菌DNA聚合酶