虐原虫检查作业指导书
检验原理
疟原虫透明无色,基本构造为核.、胞质和胞膜。把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用吉姆萨或瑞氏染剂染色后,在光学显微镜下可见核染成红色,胞质为蓝色,疟原虫分解血红蛋白后的代谢产物——疟色素不着色,仍保持原来的棕褐色、黄棕色或黑褐色。
样本
取血时间:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血;恶性疟患者,应在发作后20小时左右采血。
取血部位:从指尖或耳垂取血,婴儿可于足部取血。先用75%酒精棉球擦拭取血部位,待干后持采血针迅速刺入皮肤1-2mm深,挤出血滴涂片.间日疟宜在发作后数小时采血;恶性疟在发作初期采血可见大量环状体,一周后可见配子体。
检验材料
试剂:瑞氏染液
操作程序
4.1涂片:玻片分成六等分,第1、2格贴标签用以注明患者信息几编号等,第三格涂厚血膜,用推片将血液由内向外转涂成直径约0.8-1cm厚薄均匀的血膜,第4-6格以常用方法涂约2×2.5cm的舌形薄血膜。
4.2溶血:在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴,完全覆盖血膜,溶血约5分钟后倾去溶血液。
4.3染色方法染色前先将溶过血的厚血膜和薄血膜一起用蜡笔划好染色范围,以防滴加染液时外溢。滴染液使覆盖全部厚、薄血膜,30秒至1分钟后加等量蒸馏水,轻轻摇动载玻片,使蒸馏水和染液混合均匀,此时出现一层灿铜色的浮膜,约3-5分钟后用水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗),至血膜呈现紫灰色为止,晾干后镜检。
4.4结果判断
在油镜下观察,薄片须至少100个视野,厚血片至少20个视野,才能报告“未见疟原虫”;发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。
4.5.染片留存在固定的保存盒内,患者信息结果手工登记在《湖北省疟原虫血检登记本》上。
检验结果的解释
临床意义:
区别三种疟原虫:间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟原虫。
参考文献
《全国临床检验操作规程》第4版