纸色谱法
以纸为载体,固定相通常是滤纸上吸着的水,流动相是含水的有机溶剂。
纸色谱法一般为正相分配色谱,依据组分在两相间的分配系数不同而实现分离。
2.操作方法
(1)滤纸的选择。
(2)点样:画基线、标记试样点和点样。
(3)展开:常用上行展开。
(4)斑点定位:不能在高温下显色,也不能使用腐蚀性显色剂。
3.定性定量分析
(1)定性分析:Rf和Rr值。
(2)定量分析:用目视比色法进行半定量分析,定量分析常采用剪洗法。
第四节纸色谱法
1.基本原理
小结
1.色谱法按照两相分子的物态分类分为液相色谱法、气相色谱法;按照操作形式分类分为柱色谱法、平面色谱法;按色谱过程的分离机制分类分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、分子排阻色谱法。
2.色谱过程为不同组分与固定相间的作用强度不同而出现差速迁移,且差异被累积放大,最终实现分离。分配系数不相等是组分分离的前提。
3.吸附色谱法依据吸附剂对不同组分吸附能力的差异实现分离;分配色谱法是依据被分离的组分在固定相和流动相间的溶解度不同实现分离;离子交换色谱法是利用被分离组分离子与离子交换树脂之间的离子交换能力的差异实现分离;分子排阻色谱法是利用被分离组分分子的大小和凝胶孔径的关系实现分离。
第十三章液相色谱法
4.柱色谱法可分为吸附柱色谱法、分配柱色谱法、离子交换柱色谱法、分子排阻色谱法。
吸附柱色谱法的固定相有硅胶、氧化铝、聚酰胺、大孔树脂等;流动相根据与组分“相似相溶”的原则选择。
分配柱色谱法的固定相由由载体和固定液组成,正相分配色谱法常以强极性溶剂作为固定液,反相分配色谱法常以弱极性或者非极性溶剂作为固定液。正相分配色谱法的流动相常用极性小于固定液的醇类、石油醚类、酮类等,反相分配柱色谱的流动相常用水、甲醇等极性溶剂。
离子交换柱色谱法的固定相为离子交换树脂,流动相为以水为溶剂的缓冲溶液。
分子排阻色谱法的固定相为多孔凝胶,水溶性试样通常选择水溶液为流动相,非水溶性试样选择四氢呋喃、三氯甲烷、甲苯等有机溶剂。
第十三章液相色谱法
小结
5.薄层色谱法以吸附薄层色谱应用最为广泛,薄层色谱操作可分为制板、点样、展开、斑点定位4个步骤,常采用比吸附柱色谱法颗粒更细、更均匀的吸附剂,常采用混合展开剂展开,利用Rf或Rr值进行定性分析,定量分析方法有目视比色法、洗脱法和薄层扫描法。
6.纸色谱法一般为正相分配色谱法,以纸纤维为载体,以水为固定相,以含水的有机溶剂为展开剂,可利用Rf值或Rr值定性;纸色谱的定量分析已经很少采用。
小结
第十三章液相色谱法
第十三章液相色谱法
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